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儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
產品參數:
產品名稱 | 中間腸桿菌 |
規(guī)格 | 詳見說明書 |
貨號 | GOY-01J7225 |
實驗內容:
1.稱量→溶化→調pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌 |
使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學物質。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚,組成成分精確,重復性強,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。 (2)天然培養(yǎng)基。由天然物質制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細菌。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。 (3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質的需要。 |
保藏方法:
1.傳代培養(yǎng)保藏法 又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內保存。 2. 液體石蠟覆蓋保藏法 是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養(yǎng)物,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。 3. 載體保藏法 是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。 4. 寄主保藏法 用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染并傳代,此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。 5. 冷凍保藏法 可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。 6. 冷凍干燥保藏法 先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩(wěn)定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油。 |
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