實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠棕色脂肪干細胞

2.組織來源：脂肪組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠棕色脂肪干細胞分離自棕色脂肪組織；動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負責儲存多余熱量；棕色脂肪負責分解引發(fā)肥胖的白色脂肪，將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點是組織中有豐富的毛細血管，脂肪細胞內(nèi)散著許多小脂滴，線粒體大而豐富，核圓形，位于細胞中央，這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少，新生兒及冬眠動物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫。隨著年齡增長，棕色脂肪會逐漸消失。最終，動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細胞，分布于頸部和鎖骨。脂肪干細胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細胞，主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優(yōu)點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區(qū)的創(chuàng)傷較小；④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細胞。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠棕色脂肪干細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的大鼠棕色脂肪干細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-R229

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

衛(wèi)矛醇半固體  20支

2 ug pCAMBIA1305 pCAMBIA1305 低溫運輸，-20℃保存

3%NaClONPG  20支

1g  Hydroxyurea  4℃保存

L型細菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基 L-Bacterial Hypertonic Salt Broth 250g

5mL 成纖維細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

10mL Agarose Gel Loading Buffer (Alkaline，堿性上樣液)，6X   Aga

大鼠棕色脂肪干細胞綠膿菌素測定用培養(yǎng)基（PDP） 英文名稱：Pseudomonas Agar P 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠過氧化物體增殖因子活化受體β(PPAR-β)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基（2015藥典） 英文名稱：Columbia Blood Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)免疫試劑盒*直銷

梭菌增菌培養(yǎng)基（2015藥典） 英文名稱：Clostridium enrichment Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠過氧化氫(CAT)免疫試劑盒進口、組裝

1%聚酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：1%Tween 80-Corn Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)免疫試劑盒進口、分裝

沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Sabouraud’s Glucose Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠果糖胺(FRA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 英文名稱：Sabouraud’s Glucose Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒*直銷

膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠胱天蛋白7(Casp-7)免疫試劑盒進口、組裝

碘液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：2ml*20支 小鼠胱天蛋白5(P-5)免疫試劑盒進口、分裝

0.1%煌綠 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*20 小鼠胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Mannitol Salt Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 小鼠胱天蛋白10(P-10)免疫試劑盒*直銷