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公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
產品名稱 | 大鼠基質金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74166 |
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。?
樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
大鼠基質金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa試劑盒操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
肌鈣腔蛋白(SRL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96%,上層覆保護劑 多毛孢菌 25g
二肽基肽酶9(DPP9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96%,上層覆保護劑 豇豆慢生根瘤菌 5g
腺苷裂解酶(ADSL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 香菇(L087) 25g
苯乙肼裂解酶(NRD1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% Marisediminicola 5g
甘氨酸脒基轉移酶(GATM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種 100g
精氨酸脫羧酶(ADC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 產酸克雷伯氏菌 25g
腺苷高半胱氨酸水解酶(AHCY)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 玉蜀黍赤霉菌 500g
甘氨酸脫氫酶(GLDC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) CP 螺卷毛殼(只確定屬) 5g
組氨酸脫羧酶(HDC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 96% 松口蘑 1g
磷脂酰絲氨酸脫羧酶(PISD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 谷氨酸棒桿菌 100g
磷酸泛酰半胱氨酸脫羧酶(PPCDC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 秦氏蜜環(huán)菌 25g
尿卟啉原脫羧酶(UROD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 枯草芽孢桿菌 5g
毛透明蛋白(TCHH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 黑曲霉 100g
脂質運載蛋白12(LCN12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 栗酒裂殖酵母 25g
亞精胺合酶(SRM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 鉆特省芽孢桿菌 5g
法尼基轉移酶α(FNTα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) EC600* 25g
類脂肪酶A(LPHA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) 塔賓曲霉 5g
脂素1(LPIN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) 巴氏醋桿菌 5g
動物皮膚組織細胞分離培養(yǎng) LYAR 25 ml each
動物脾臟組織細胞分離培養(yǎng) LY96 100 ul
動物胸腺組織細胞分離培養(yǎng) LYN 1 Kit
動物甲狀腺組織細胞分離培養(yǎng) LYG1 100 ul
動物扁桃腺組織細胞分離培養(yǎng) LYPLA1 100 ul
動物腫瘤組織細胞分離培養(yǎng) LYRM7 100 ul
人體NK細胞分離 LYPLAL1 100 ul
結晶紫細胞群落染色 LUC7L 100 ul
細胞活力藍色熒光 LSM5 100 ul
細胞活力臺盼藍染色 LUC7L2 1 Kit
中性紅細胞繁殖比色法定量 LSM7 100 ul
MTT比色法細胞繁殖測定 LSM8 100 ul
MTS比色法細胞繁殖定量 LSP1 20 ul
PICOGREEN細胞繁殖定量 LSR 300 ul
G-B細胞活力和凋亡 LTBP1(Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1) 100 ul
ATP生物發(fā)光法細胞繁殖與性定量 LUC7L 100 ul
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