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大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 11:18:24瀏覽次數(shù):126次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
貨號 GOY-01X1078
大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品:麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基 規(guī)格: 15.6g/100ml
218916-52-0千金子二萜二乙酰甲酰酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
阿多弗林 規(guī)格: 10mg
114902-16-8刺五加皂B 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
78214-33-2人參皂Rh2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
六異 規(guī)格: 100mg
484-29-7白鮮 規(guī)

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產(chǎn)品名稱

大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1078

商品介紹:

名稱 大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞

2.組織來源:脈絡膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用,對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養(yǎng)和遮光作用。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性混合消化法并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R124

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6   Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.6   常溫保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Thymidine kinase 2, mitochondrial

10mL 溶液,50mg/mL Spectinomycin Solution 4℃避光干燥保存 0.312-20 ng/mL 人磷脂?;级嗑厶翘禺愋粤字珼 (PI-G PLD)

大鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞RS培養(yǎng)基(RS瓊脂平板) RS Medium 100g

1瓶 THP-1細胞株 THP-1 低溫運輸和保存

250mL Sodium Citrate Buffer(檸檬酸鈉緩沖液),0.5M, pH6.0   Sodium Citrate Buffer,0.5M, pH6.0   常溫保存

1mL 分子生物學級糖原溶液,10mg/mL Glycogen Solution 4℃保存

1g 膠原蛋白Ⅰ型 Collagen TypeⅠ 4℃保存

50T 致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

50次 液體樣品蛋白純化回收試劑盒 Liquid Sample Protein Purification Kit 常溫保存

2 ug pGEX-4T- 2 pGEX-4T- 2 低溫運輸,-20℃保存

RVS肉湯 RVS Broth 250g

2 ug pLOX-gfp-iresTK pLOX-gfp-iresTK 低溫運輸,-20℃保存

Goat Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

IKK gamma/IKBKG  KB抑制蛋白激γ抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CaMK2 alpha (Tyr231)  磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體 規(guī)格: 0.1ml

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