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Lipo8000?轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2019-05-31 13:44:27瀏覽次數(shù):4556次

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Lipo8000?轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品名稱:Lipo8000?轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書
規(guī)格:0.5ml
儲(chǔ)存條件:—20℃,12個(gè)月
用途:又稱培養(yǎng)細(xì)胞消化液,用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項(xiàng):無(wú)菌溶液,經(jīng)過(guò)濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料:
1、 PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng):
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過(guò)程中,要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說(shuō)明: 
1. 貼壁細(xì)胞的消化: 
a.吸去培養(yǎng)液,用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA),略蓋過(guò)細(xì)胞,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。 
c.顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。 
2. 組織的消化: 
a.不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄:不同胰酶細(xì)胞消化液的比較和選擇 
1. 如果希望消化能力比較強(qiáng),推薦選擇C0201胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細(xì)胞消化液都含有EDTA,消化能力相對(duì)更強(qiáng)一些。 
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。 
3. 對(duì)于酚紅可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析,推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。 
4. 對(duì)于EDTA可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析時(shí),推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。 
5. 對(duì)于胰酶特別敏感的細(xì)胞,即對(duì)于消化時(shí)間特別快、消化時(shí)間比較難控制的情況,推薦選擇C0202胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。 2

36978-51-5

3-溴-5-氯-1,2,4-噻二唑 37159-60-7

2-(2-萘基)乙酰氯 37859-25-9

2-乙酰胺基苯硼酸頻哪醇酯 380430-61-5

5-苯基-2-三唑胺 39136-63-5

2-溴丙酸叔丁酯 39149-80-9

(5-三氟甲基吡啶-2-基)甲醇 31181-84-7

3,4-亞甲二氧苯乙酮 3162-29-6

4-三氟甲硫基苯甲酰氯 330-14-3

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