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109次牛胚氣管細(xì)胞;EBTr (NBL-4)使用說明書
規(guī)格:25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶,密度70%以上
特點:細(xì)胞代數(shù)為3-4代左右
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;說明書
運輸方式:快遞運輸
細(xì)胞活力 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件 詳見細(xì)胞說明書
傳代方法 建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
細(xì)胞處理:
1)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3)用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4)建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
牛胚氣管細(xì)胞;EBTr (NBL-4)注意事項:
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
3)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。
4)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細(xì)胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
脂肪水解酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱: Lipase(Candida) 含量: BR,類型F-300,130u/mg
氯化酵素 進口、國產(chǎn) 英文名稱: CAT 含量: BR,類型III,25u/mg
脆壁質(zhì)酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱: Lysozyme(Chinken egg) 含量: USP級,1:30000
溶葡萄球菌酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱: Lysostaphin 含量: 高純,1:15000
溶菌酶氯化物 進口、國產(chǎn) 英文名稱: Lysozyme chloride 含量: 高純,1:10000
1,4-β-D-葡聚糖葡糖苷水解酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱: Cellulase(Trichoderma Vride G) 含量: USP級,1:3000
牛胚氣管細(xì)胞;EBTr (NBL-4)
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