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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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干血斑基因組DNA提取試劑盒

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)32次/盒

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-11-19 14:51:48瀏覽次數(shù):137次

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規(guī)格 32次/盒 、50次/盒 貨號(hào) YS-P013220
品牌 YSRIBIO
干血斑基因組DNA提取試劑盒原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

干血斑基因組DNA提取試劑盒

50次/盒

YS-P013220

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對(duì)原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

B淋巴瘤因子2(Bcl-2)秋水仙堿三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

人尿微量白蛋白(MAU)秋水仙堿(標(biāo)準(zhǔn)品)載脂蛋白B抗體

人促黃體生成激素(LH)硫酸粘桿菌素,多粘菌素E硫酸鹽花生四烯酸15脂氧合酶2抗體

人腎素(REN)硫酸粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)載脂蛋白C4抗體

人組織蛋白酶C(CTSC)  吡啶硫酮銅低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體

C-肽(C-P)鹽酸依氟鳥(niǎo)氨酸原始廣泛存在蛋白1抗體

人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)色甘酸鈉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體

人載脂蛋白A1(ApoA1) 色甘酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1

人層粘蛋白(LN)環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體

I型膠原(COL1)環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品)膜粘連蛋白2受體抗體

人基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP-25)鹽酸噻氯匹定血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體

人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)鹽酸噻氯匹定(標(biāo)準(zhǔn)品)拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體

人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)阿糖胞苷(進(jìn)分)α-1抗胰糜蛋白酶抗體

人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)阿糖胞苷α-1抗胰蛋白酶抗體

人可溶性間粘附分子1(sICAM-1/CD54)阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)ATP結(jié)合蛋白家族6抗體

人降鈣素(CT) 達(dá)卡巴三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體
干血斑基因組DNA提取試劑盒ACD  腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體二甲基烯酸1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 穩(wěn)定劑, 95%

AchE  乙酰膽堿酶抗體二烯酸1,3-丁二酯, 含500 ppm 對(duì)苯二酚(HQ)穩(wěn)定劑, 98%

Acinus   Acinus抗體苯磺酸 98%

phospho-Acinus(Ser1180)  磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體正丁硫 standard for GC, ≥99% (GC)

Ack1  醋酸激酶1抗體N-丁基二乙 99%

Phospho-Ack1(Tyr857/858)  磷酸化Ack1抗體雙酚A三雙甲基烯酸酯 試劑級(jí)

Phospho-Ack1(Tyr284)  磷酸化Ack1抗體1-芐基哌 97%

Phospho-Ack1(Tyr326)  磷酸化Ack1抗體3-溴苯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析
反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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