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人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 A375說明

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更新時間:2016-12-28 13:23:41瀏覽次數(shù):212次

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適用領(lǐng)域 科研
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]說明冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]說明凍存過程:
將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中,用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮中。
公司出售細(xì)胞培養(yǎng)、人細(xì)胞培養(yǎng)、小鼠細(xì)胞培養(yǎng)、大鼠細(xì)胞培養(yǎng)等動物細(xì)胞,幾乎能滿足多數(shù)客戶的實(shí)驗(yàn)要求。公司是廣大顧客細(xì)胞購買理想的單位之一。細(xì)胞詳細(xì)參數(shù)如下:
1) 用途:提供用于科研的穩(wěn)定細(xì)胞系
2) 包裝規(guī)格:25cm*cm(>1000000個細(xì)胞)
3) 保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
4) 細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞名稱      人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]說明
形態(tài)特性       上皮樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       A375源自一位54歲女性,是Giard DJ等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。該細(xì)胞可在免疫抑制小鼠上成瘤,在瓊脂上形成克隆。 
培養(yǎng)條件       DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法      
傳代情況      PN
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測      陰性
STR       Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,14;D16S539:9;D18S51:12,17;D19S433:13,14.2;D21S11:29,30;D2S1338:16,24;D3S1358:15,17;D5S818:12;D7S820:9;D8S1179:11,14;FGA:23;TH01:8;TPOX:8,10;vWA:16,17
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      B類
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]說明細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn):
1. 實(shí)驗(yàn)開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后,才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株,即使培養(yǎng)基*相同也不可共用培養(yǎng)基,以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后,請將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺,用70%再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后,才能進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時放置,其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出,有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成,請勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。
3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品,避免細(xì)菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后,請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全,必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺進(jìn)行(至少是Class II)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項(xiàng)目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時更換)。
5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時/預(yù)濾網(wǎng),3000小時/HEPA)。
6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
GAD65    pFA6a-6xGLY-HSV-hphMX4(pFA6a6xGLYHSVhphMX4)
GAD65 + GAD67    pFA6a-6xGLY-Myc-HIS3MX6(pFA6a6xGLYMycHIS3MX6)
GAD67    pFA6a-6xGLY-Myc-hphMX4(pFA6a6xGLYMychphMX4)
GADD153    pFA6a-6xGLY-Myc-hphMX4(pFA6a6xGLYMychphMX4)
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]說明GADD34    pFA6a-6xGLY-S-tag-HIS3MX6(pFA6a6xGLYStagHIS3MX6)
GADD45    pFA6a-6xGLY-S-tag-HIS3MX6(pFA6a6xGLYStagHIS3MX6)
GADD45 gamma    pFA6a-6xGLY-Strep-tagII-HIS3MX6(pFA6a6xGLYStreptagIIHIS3MX6)
GADD45B    pFA6a-6xGLY-Strep-tagII-hphMX4(pFA6a6xGLYStreptagIIhphMX4)
GADD45GIP1    pFA6a-6xGLY-Strep-tagII-hphMX4(pFA6a6xGLYStreptagIIhphMX4)
GADL1    pFA6a-6xGLY-T7-hphMX4(pFA6a6xGLYT7hphMX4)
GAK protein    pFA6a-6xGLY-V5-hphMX4(pFA6a6xGLYV5hphMX4)
GAL4    pFA6a-6xGLY-V5-hphMX4(pFA6a6xGLYV5hphMX4)
Galactocerebroside    pFA6a-bleMX6(pFA6ableMX6)
Galactose kinase    pFA6a-GFP(S65T)-His3MX6(pFA6aGFP(S65T)His3MX6)
Galactosidase alpha    pFA6a-GFP(S65T)-kanMX6(pFA6aGFPS65TkanMX6)
Galanin    pFA6a-GFP(S65T)-TRP1(pFA6aGFPS65TTRP1)
GALC/Galactosylceramidase    pFA6a-GST-His3MX6(pFA6aGSTHis3MX6)
GALE    pFA6a-GST-kanMX6(pFA6aGSTkanMX6)
Galectin 1    pFA6a-GST-kanMX6(pFA6aGSTkanMX6)
Galectin 10    pFA6a-GST-TRP1(pFA6aGSTTRP1)
Galectin 12    pFA6a-His3MX6(pFA6aHis3MX6)
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體    牛皰疹病毒3型PCR檢測試劑盒
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體    牛特定基因序列PCR檢測試劑盒
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體    牛瘟病毒PCR檢測試劑盒
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1抗體    牛錐蟲PCR檢測試劑盒
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體    瘧原蟲PCR檢測試劑盒
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體    諾沃克病毒PCR檢測試劑盒
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體    偏肺病毒PCR檢測試劑盒
腺苷A2A受體抗體    破傷風(fēng)桿菌PCR檢測試劑盒
腺苷A1受體抗體    破傷風(fēng)芽孢梭菌PCR檢測試劑盒
腺苷A1A受體抗體    普氏立克次體PCR檢測試劑盒
腺病毒早期E1A蛋白抗體    氣單胞菌PCR檢測試劑盒
腺病毒六鄰體蛋白抗體    氣腫疽梭菌PCR檢測試劑盒
腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體    侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒
線性泛素鏈相關(guān)蛋白SHARPIN抗體    芹菜PCR檢測試劑盒
線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體    禽白血病病毒PCR檢測試劑盒
線粒體轉(zhuǎn)錄因子1抗體    禽傳染性支氣管炎病毒PCR檢測試劑盒
線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體    禽呼腸孤病毒PCR檢測試劑盒
線粒體載體同源蛋白2抗體    禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒
線粒體乙酰化酶3抗體    禽流感病毒H5N1亞型PCR檢測試劑盒
人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A-375 [A375]說明售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決。

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