英文名稱   Anti-phospho-EGFR (Tyr1197)

中文名稱  磷酸化表皮生長因子受體抗體

別    名  EGFR; Avian erythroblastic leukemia viral (v erb b) oncogene homolog; Avian erythroblastic leukemia viral (verbb) oncogene homolog; Cell growth inhibiting protein 40; Cell proliferation inducing protein 61; EGF R; EGFR; Epidermal growth factor receptor (avian erythroblastic leukemia viral (v erb b) oncogene homolog); Epidermal growth factor receptor (erythroblastic leukemia viral (v erb b) oncogene homolog avian); Epidermal growth factor receptor; erbb 1; Erbb; Erbb1; HER1; mENA; Oncogene ERBB; PIG61; Receptor tyrosine protein kinase ErbB 1; Receptor tyrosine protein kinase ErbB1; Urogastrone; wa2; Wa5.

濃 度：  1mg/1ml

規(guī) 格  0.1ml/100μg     

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產(chǎn)品類型  一抗  磷酸化抗體   

研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學 生長因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 170kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human EGFR around the phosphorylation site of Tyr1197

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產(chǎn)品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳suan氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

2,6-二氟苯 97%肌球蛋白ⅠE(MYO1E)ELISA試劑盒N-1-甲基煙酰檢測試劑盒

4-氟氯芐 98%肌球蛋白ⅠD(MYO1D)ELISA試劑盒Asc型氨基轉(zhuǎn)運蛋白1檢測試劑盒

鄰氟氯芐 98%肌球蛋白ⅠC(MYO1C)ELISA試劑盒囊蟲病IgG抗體檢測試劑盒

對氟苯甲 98%肌球蛋白ⅠB(MYO1B)ELISA試劑盒白介8檢測試劑盒

對氟苯甲酰氯 98%肌球蛋白ⅠA(MYO1A)ELISA試劑盒流行性腦脊髓膜炎病IgM抗體檢測試劑盒

鄰氟苯甲酰氯 97%肌侵蛋白(MTPN)ELISA試劑盒Janus激2檢測試劑盒

4,4'-二氟二苯甲酮 99%肌切蛋白(SCIN)ELISA試劑盒分揀蛋白1檢測試劑盒

甲基三苯基溴化鏻 98%肌鈀蛋白(MYPN)ELISA試劑盒鳥環(huán)化檢測試劑盒

雙戊烯 95%肌聯(lián)蛋白(TTN)ELISA試劑盒?；oA合成長鏈家族成員3檢測試劑盒

4-異苯 98%肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒膠原Ⅳ型α1檢測試劑盒

4-異苯 分析標準品,>99.5% (GC)肌腱蛋白X(TNX)ELISA試劑盒紅膜蛋白抗體檢測試劑盒

4-異苯 ≥97%, FCC肌腱蛋白R(TNR)ELISA試劑盒連接黏附分子-A檢測試劑盒

4-異苯 standard for GC, ≥99.5% (GC)肌腱蛋白N(TNN)ELISA試劑盒四加半LIM域蛋白1檢測試劑盒

α-蒎烯 95%肌腱蛋白M4(TENM4)ELISA試劑盒腎臟雄激調(diào)節(jié)蛋白檢測試劑盒

萜品油烯 85%肌腱蛋白M3(TENM3)ELISA試劑盒轉(zhuǎn)錄因子E2F2檢測試劑盒
Anti-phospho-EGFR (Tyr1197)抗體Anti-TETRODOTOXIN ( TTX )  抗體

Anti-TP-1/TEP1  端粒相關(guān)蛋白1抗體

Anti-Tetraspan5  四分子交聯(lián)體5抗體

Anti-TFF2  三葉肽因子2抗體

Anti-TFF3  三葉肽因子3抗體

Anti-TIF1 Alpha/TRIM24  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體

Anti-TIF1 beta/KAP1  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體

Anti-Phospho-TIF1beta (Ser824)  磷化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體