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小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)

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更新時間:2016-12-30 13:23:37瀏覽次數(shù):175次

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適用領(lǐng)域 科研
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。

小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)凍存過程:
將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中,用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮中。
公司出售細胞培養(yǎng)、人細胞培養(yǎng)、小鼠細胞培養(yǎng)、大鼠細胞培養(yǎng)等動物細胞,幾乎能滿足多數(shù)客戶的實驗要求。公司是廣大顧客細胞購買理想的單位之一。細胞詳細參數(shù)如下:
1) 用途:提供用于科研的穩(wěn)定細胞系
2) 包裝規(guī)格:25cm*cm(>1000000個細胞)
3) 保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
4) 細胞生長:貼壁生長
細胞名稱      小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)
形態(tài)特性       上皮樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       該細胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織,含SV40病毒的DNA序列,保留了皮質(zhì)集合管的某些特性,如形態(tài)和CCD(皮質(zhì)結(jié)合管)抗原。大多M-1細胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細胞或主細胞的特征;5%~10%的細胞有閏細胞和主細胞的雙重表型。當該細胞在滲透性支持物上生長時,可形成具有負跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu)。 
培養(yǎng)條件       DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法       1:3~1:4傳代;每周換液2~3次。
傳代情況      C4
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測      培養(yǎng)法(-)
STR       -
同工酶      
染色體      
使用權(quán)限      A類
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點:
1. 實驗開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后,才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株,即使培養(yǎng)基*相同也不可共用培養(yǎng)基,以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后,請將實驗物品拿出工作臺,用70%再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后,才能進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時放置,其它實驗用品使用完畢后應(yīng)移出,有利于空氣流通。實驗用品需70%擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作過程應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成,請勿在邊緣非無菌區(qū)域進行操作。
3. 小心取用無菌實驗物品,避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后,請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應(yīng)當首先注意自身安全,必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應(yīng)當特別小心操作,并選擇適當?shù)燃壍臒o菌操作臺進行(至少是Class II)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時更換)。
5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預濾網(wǎng)(300小時/預濾網(wǎng),3000小時/HEPA)。
6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
SKA2    SKA2    信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體
SIM1    SIM1    核轉(zhuǎn)錄因子SOX6抗體
SOX14    SOX14    核轉(zhuǎn)錄因子SOX8抗體
STAT1 p84+p91    STAT1 p84+p91    STAC1蛋白抗體
SOX6    SOX6    亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體
SOX8    SOX8    雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)STAC    STAC    溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體
Spindly    Spindly    SNX27蛋白抗體
STAU2    STAU2    電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體
Slc22a5    Slc22a5    5-羥色胺受體4抗體
SNX27    SNX27    5-羥色胺受體3抗體
NAV1.7    NAV1.7    抑癌基因SNF2β抗體
5HT4 Receptor     5HT4 Receptor     血清應(yīng)答因子抗體
5-HTR3    5-HTR3    膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體
BRG-1    BRG-1    泛素樣修飾體-1抗體
SRF    SRF    信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體
100ml    個    Gallic acid 沒食子酸
250ml    個    Gallic acid trimethyl ether 3,4,5-*氧基苯甲酸
500ml    個    Galanthamine base 加蘭他敏
1000ml    個    Galangin 高良姜素
50張    盒    G6P-DH 6-磷酸葡萄糖脫氫酶
0.22um    盒    G-418 Sulfate 遺傳霉素
0.45um    盒    G-418 Sulfate 遺傳霉素
0.22um    盒    G-418 Sulfate 遺傳霉素
0.45um    盒    Fuziline 附子靈
0.22um    盒    Fumonisin B2 伏馬毒素B2
0.45um    盒    Fumonisin B1 伏馬毒素B1
0.22um    盒    Fucoxanthin 巖藻黃素
0.45um    盒    Fuchsin basic 堿性品紅
1000支    包    Fructus Jujubae Extract 紅棗多糖-大棗多糖
500支    包    Fructose 果糖
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1培養(yǎng)售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決。

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