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人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人蛋白激酶A(PKA)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human protein kinase A (PKA) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11173 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
乳癌易感基因1抗原(小鼠 大鼠) 0.5mgBRCA1(Breast cancer susceptbility gene 1)(mouse rat)
CC趨化因子受體2/5抗原 0.5mgCCR-2/5(CC chemokine receptor 2/5)
嗜鉻粒素B抗原 0.5mgCGB(Chromogranin B)
凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗原 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1)
促卵泡刺激素抗原 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor)
VSV-G tag標簽抗原 0.5mgVSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein)
蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗原 0.5mgJAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1)
周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原 0.5mgPMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2)
凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗原 0.5mgTFAR19(TF-1 cell apoptsis-related gene 19)
乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運蛋白1抗原 0.5mgSLC33A1(Acetyl-coenzyme A transportor 1)
自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3)
周期素 C(抗原) 0.5mgCyclin C
多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原) 0.5mgMRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3)
VSIG4 T淋巴細胞負調(diào)節(jié)蛋白之一(抗原) 0.5mgVSIG4 (V-set and immunoglobulin domain-containing protein 4)
人蛋白激酶A(PKA)ELISA檢測試劑盒2 ug pEGFP-Tub pEGFP-Tub 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGM-11ZF(+) pEGM-11ZF(+) 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGM-3ZF(+) pEGM-3ZF(+) 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pLV-EFGL pLV-EFGL 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGFP- C1 pEGFP- C1 低溫運輸,-20℃保存
2 ug p334 p334 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGFP- C2 pEGFP- C2 低溫運輸,-20℃保存
2 ug p3×FLAG-CMV-10 p3×FLAG-CMV-10 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGFP- C3 pEGFP- C3 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGFP-LC3 pEGFP-LC3 低溫運輸,-20℃保存
2 ug p3×FLAG-CMV-14 p3×FLAG-CMV-14 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pEGFP- N1 pEGFP- N1 低溫運輸,-20℃保存
2 ug p3×FLAG-CMV-24 p3×FLAG-CMV-24 低溫運輸,-20℃保存
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