試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服務(wù)：
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

磷酸化Bax抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-Bax (Thr167)

腦環(huán)核苷酸門控通道蛋白1抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：BCNG1

磷酸化淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集素抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-C-REL (Ser503)

7號染色體開放閱讀框65抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：C7orf65

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：CDKN2B

染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：CHMP1B

鈣離子通道a1F亞型抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：CACNA1F

周期素B1抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：Cyclin B1

8號染色體開放閱讀框55抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：C8orf55

7號染色體開放閱讀框59抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：C7orf59

3號染色體開放閱讀框62抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：C3ORF62

磷酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 規(guī)格： 0.1ml 英文名稱：phospho-CDC27 (Thr244)

α1-chimaerin蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：Alpha chimerin

補(bǔ)體C1qTNF8鏈多肽抗體 規(guī)格： 0.2ml 英文名稱：C1QTNF8

人補(bǔ)體7(C7)ELISA檢測試劑盒1kg 變色硅膠 Silica Gel 室溫干燥保存

25g 硝酸銀 Silver Nitrate 室溫干燥避光保存

1g 芥子酸 Sinapic Acid 室溫干燥保存

10Ku 超氧化物歧化酶 SOD -20℃保存

25g 疊氮鈉 Sodium Azide 常溫保存

100g 鈉 Sodium Chloride 密封保存

100g 檸檬酸鈉，二水 Sodium Citrate Dihydrate 室溫保存

5g  Sodium Cyanoborohydride  室溫陰涼干燥保存

25g 氟化鈉 Sodium Fluoride 室溫保存

25g 十二烷基肌氨酸鈉 Sodium Lauroylsarcosine 室溫保存

25g 偏釩酸鈉 Sodium Metavanadate 室溫保存

25g 原釩酸鈉，十二水 Sodium Orthovanadate Dodecahydrate 室溫密封保存

25g 琥珀酸鈉，六水 Sodium Succinic Hexahydrate 室溫保存

操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。