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服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Mouse platelet factor 3 (PF-3) ELISA Kit |
貨號 | YS-M10541 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
DRAXIN 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB 50 µg
EphA1 / Eph Receptor A1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
GYPA / CD235a / Glycophorin A 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P 50 µg
CISD1 / ZCD1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IP 50 µg
KIRREL2 / NEPH3 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
KIRREL2 / NEPH3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
IL-5 / IL5 / Interleukin 5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB 50 µg
NCF2 / NCF-2 / P67phox 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IP 50 µg
NCF2 / NCF-2 / P67phox 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
IL-5 / IL5 / Interleukin 5 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
NCF2 / NCF-2 / P67phox 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
RGS1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
Biotinidase / biotinase / BTD 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測試劑盒苯甲酰次堿;Benzoylhypac 63238-66-4 規(guī)格: 20mg
磺胺間二甲氧;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 57-68-1 規(guī)格: 0.1g
2;4-滴異辛酯;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 25168-26-7 規(guī)格: 0.1g
莎稗磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品-莎薭磷;有證書 64249-01-0 規(guī)格: 0.1g
呋草黃;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 68505-69-1 規(guī)格: 0.1g
四;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 117-18-0 規(guī)格: 0.1g
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 2 規(guī)格: 0.1g
螟丹(巴丹);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 22042-59-7 規(guī)格: 0.1g
甲基磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 35575-96-3 規(guī)格: 0.1g
丁;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 23184-66-9 規(guī)格: 0.1g
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 71697-59-1 52315-078 規(guī)格: 0.1g
D-果糖;標(biāo)準(zhǔn)品 57-48-7 規(guī)格: 0.25g
抗壞血酸(維生素C);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有 50-81-7 規(guī)格: 0.25g
柚皮苷查爾 73692-50-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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