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人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA檢測試劑盒
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human hepatitis IgM (HCV-IgM) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11083 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
MSH2抗原 0.5mgMSH2 (mutS homolog 2)
鋅指脂蛋白-1b(抗原) 0.5mgZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b)
表皮生長因子多肽 0.5mgEGF(Epidermal growth factor)rat
神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原 0.5mgNSE
熒光素標(biāo)記馬IgG 0.3mlHorse IgG/FITC
熒光素PE標(biāo)記牛IgM 0.1mlBovine IgM/PE
熒光素Cy3標(biāo)記小鼠IgM 0.1mlMouse IgM/Cy3
熒光素標(biāo)記兔抗FITC 0.3mlRb Anti-FITC/FITC
人胸腎表達(dá)趨化因子 96TBRAK/CXCL14(Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK) ELISA Kit
胰癌相關(guān)抗原 96TCA199
肺炎支原體 IgM(間接法二步法)MP IgM
人內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白CHOP 96Thuman CHOP ELISA Kit
大豆凝集素 96TSoybean agglutinin,SBA ELISA Kit
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 96TBDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit
人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA檢測試劑盒1g 苯 Phenylmethyl Sulfonyl Fluoride(PMSF) 室溫保存
100mg 6- 磷酸葡萄糖鋇鹽 6-Phosphogluconic Acid Barium salt Hydrate 室溫干燥避光保存
100g 植物凝膠 Phytagel (Gellan Gun) 室溫保存
10g 植酸鈉 Phytic Acid Sodium Salt Hydrate 室溫陰涼保存
25g 豬膽鹽 Pig Bile Salts 室溫保存
10g 1,4- 二乙磺酸 1,4-Piperazinediethane Sulfonic Acid (PIPES) 室溫干燥保存
100mL 聚乙烯亞胺 Poly(Ethyleneimine) Solution 室溫保存
25mL 聚乙二醇溶液 Poly(Ethylene Glycol Solution) 4℃保存
1g 多聚半乳糖醛酸鈉鹽 Polygalacturonic Acid Sodium Salt 室溫保存
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (15-30 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (3-7 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
25mg 多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 ) Poly-L-Lysine -20℃保存
100mg 多粘菌素 B 硫酸鹽 Polymyxin B Sulfate 4℃保存
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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