公司向您推薦PrimaCell™人肝癌組織源細(xì)胞試劑盒的詳細(xì)說明：

細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長特性，在適當(dāng)?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
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實驗操作步驟：
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

冰凍切片組織細(xì)胞色素C氧化酶表達免疫組織化學(xué)檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

離體培養(yǎng)再生（rhizogenesis）培養(yǎng)基 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：500毫升溶/片劑

人血免疫球蛋白G（IgG）免疫比濁法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞凝血酶/活化凝血因子II（THROMBIN/FACTOR IIa）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

體CMV（CYTOMEGALOVIRUS）病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

羥脯氨酸（HYP）高效相色譜定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

纖維蛋白溶酶原激活劑抑制物（PAI）活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞VZV（VARICELLA ZOSTER）病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3（PASE-3）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織活化凝血因子10（FACTOR Xa）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

體HSV2（HERPES SIMPLX2）病毒定性檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細(xì)胞丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次

PrimaCell™人肝癌組織源細(xì)胞試劑盒氯1-丁-2,3-二甲咪唑分子式：188.7英文名稱：Chlorinated 1- butyl -2,3- two號：98892-75-2分子量： C9H17ClN2

3--5-異噁唑分子式：160.17英文名稱：3- phenyl -5- aminoisoxazole號：4369-55-5分子量： C9H8N2O

玫瑰桃紅R英文名稱：Bordeaux R分子式：502.43分子量： C20H12N2Na2O7S2號：5858-33-3

馬兜鈴B英文名稱：Aristolochic acid B分子式：311.24576分子量：C16H9NO6號：475-80-9

青藤堿英文名稱：Sinomenine hydrochloride分子式：365.85分子量：C19H23NO4·HCl號：6080-33-7

2-氯-3--6-甲吡分子式：152.58英文名稱：2- chloro -3- cyano -6- methyl pyridine號：28900-10-9分子量： C7H5ClN2

甲三亞砜分子式：330.81英文名稱：Methyl three methyl號：62059-33-0分子量： C9H12ClO3PS3

2-氟-6-硝甲分子式：155.13英文名稱：2- -6- nitro toluene號：769-10-8分子量： C7H6FNO2

3,3'-二甲偶氮分子式：210.27英文名稱：3,3'- two methyl Azobenzene號：588-04-5分子量： C14H14N2

三氯甲分子式：195.47英文名稱：Three Cl號：35983分子量： C7H5Cl3

豆腐果新苷A英文名稱：Tofu fruit newsaponin A分子式：分子量：號：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。