當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>DNA提取試劑盒>> 1mL單細胞裂解液(RNA)
規(guī)格 | 1mL | 貨號 | YS-P013283 |
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品牌 | YSRIBIO |
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐
的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:單細胞裂解液(RNA)
產品貨號:YS-P013283
產品規(guī)格:1mL
產品分類:PCR檢測試劑盒
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
人S100鈣結合蛋白A6(S100A6) 法羅培南(鈉)(2.5水)腦富含膜附著信號蛋白1抗體
人S100鈣結合蛋白A7 (S100A7) 法羅培南鈉(標準品)卵黃狀黃斑病蛋白3抗體
人S100鈣結合蛋白B (S100B) 芐基肼卵黃狀黃斑病蛋白抗體
人多配體聚糖1(SDC1)芐基肼(標準品)卵黃狀黃斑病蛋白4抗體
人干因子(SCF)苯甲氟/PMSF炭疽桿菌菌體蛋白抗體
人干因子受體(SCFR/c-Kit)奧利司他EBV立即早期基因BRLF1抗體
人甘肽/甘素(GAL) 利福霉素鈉;利福霉素SV鈉腦表達X連鎖蛋白4抗體
人甘肽/甘素受體1(GALR1) 醋酸奧曲肽B淋巴新型蛋白1抗體
人甘露聚糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶(MASP)S(+)-2-氨基-1-丁核突觸蛋白β抗體
人甘露糖結合蛋白(MBP/MBL) D-鞘氨BTRC2蛋白抗體
人磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)糖脂;植物鞘BEND3蛋白抗體
人肝癌抗原(PHC)甲苯磺丁脲BEND4蛋白抗體
人肝臟/紅酮酸激酶(PK)甲苯磺丁脲(標準品)BEND6蛋白抗體
人肝臟糖原磷酸化酶(PYGL)奧美拉唑 胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體
人分泌型卷曲相關蛋白2 (SFRP2)奧美拉唑 (標準品)巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白2抗體
人高爾基蛋白73(GP-73) 氯唑沙宗巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白5抗體
單細胞裂解液(RNA)CD45 CD45單克隆抗體特布他林半硫酸鹽 分析標準品
CD46/MCP 膜輔蛋白抗體氧化鈦(IV) 99%,325 目,粉末
CD46/MCP 膜輔蛋白抗體氧化鈦(IV),銳鈦礦 99.9% metals basis,粉末
CD45RO CD45RO抗2,3,4,6-四氯酚 分析標準品
CD48/SLAMF2 CD48抗體叔丁基亞磺酰氯 97%
CD58/LFA-3 淋巴功能相關抗原-3抗體二甲基烯酸四乙二酯 包含~0.006% 對苯二酚 穩(wěn)定劑, 90%
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗體硫鏈絲菌肽 90%
CD5 CD5抗體三苯基硅乙炔 98%
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