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當(dāng)前位置:上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞培養(yǎng)、鑒定試劑盒>> Primarker™人胃粘膜上皮細(xì)胞鑒定試劑盒
PrimaCell™人卵巢成纖維細(xì)胞試劑盒規(guī)格
公司向您推薦Primarker™人胃粘膜上皮細(xì)胞鑒定試劑盒的詳細(xì)說明:
產(chǎn)品名稱 | Primarker™人胃粘膜上皮細(xì)胞鑒定試劑盒 |
規(guī)格 | 6次/盒 |
貨號(hào) | YS-X6887 |
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng):
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10%小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中,培養(yǎng)對(duì)細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時(shí)還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長特性,在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候進(jìn)行傳代,一般3~4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代:
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞,一般按1:2-1:5 稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。?
實(shí)驗(yàn)操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動(dòng)物。
b.立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個(gè); 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個(gè)
4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
血總氨基酸含量熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
冰凍切片組織PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
載玻片細(xì)胞PASE-7蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
組織NAD依賴性甘油醛-3-脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細(xì)胞過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
桌面DNA清除溶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:500毫升
飼料乙酸比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細(xì)胞二酯酶4(PDE4)活性熒光定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10次
石蠟切片組織PASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
精漿果糖含量比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
細(xì)胞總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
PASE-7蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
Primarker™人胃粘膜上皮細(xì)胞鑒定試劑盒2-乙-6-分子式:246.09英文名稱:2- ethyl -6- methyl iodophenyl號(hào):175277-95-9分子量: C9H11I
辛酰分子式:158.24英文名稱:Xin Xianjing號(hào):6304-39-8分子量: C8H18N2O
4-乙酰-TEMPO分子式:213.3英文名稱:4- acetyl -TEMPO號(hào):14691-89-5分子量: C11H21N2O2
3-氯-2-氟甲分子式:144.57英文名稱:3- -2- fluoride號(hào):85089-31-2分子量: C7H6ClF
直接綠BE英文名稱:Direct green BE分子式:分子量:號(hào):
鎂試劑I英文名稱:Magnesium reagent I分子式:259.22分子量: C12H9N3O4號(hào):74-39-5
何首烏苷英文名稱:Polygonum multiflorum glycosides分子式:406.39分子量:C20H22O9號(hào):55327-45-2
1,1'-二-4,4'-二氯聯(lián)吡鎓分子式:381.3英文名稱:1,1'- two -4,4'- two phenyl pyridinium chloride combined號(hào):47369-00-6分子量: C22H18Cl2N2
銀杏內(nèi)酯C英文名稱:Ginkgo biloba C分子式:440.39796分子量:C20H24O11號(hào):15291-76-6
鉍鉀分子式:1253.7英文名稱:Bismuth potassium iodide號(hào):41944-01-8分子量: BiI3·4KI
二乙分子式:118.15英文名稱:Two vinyl號(hào):77-77-0分子量: C4H6O2S
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
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