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操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human euglobulinlysis (EL) ELISA Kit |
貨號 | YS-H12661 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG/PE-Cy7
PE-Cy5.5標記的兔抗豬IgG 0.1mlRabbit Anti-pig IgG/PE-Cy5.5
羅丹明標記的驢抗兔IgG 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/RBITC
活性依賴的神經(jīng)保護肽(抗原) 0.5mgADNP (NAP) (Activity-dependent Neuroprotective protein )
肥大細胞類糜蛋白酶1 0.5mgMast Cell Chymase
腎上素能受體β3 0.5mgADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor)
載脂蛋白A1抗原 0.5mgapoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human
谷氨酸受體(抗原) 0.5mgNR2B (Glutamate receptor)
環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗原 0.5mgCAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2)
白細胞分化抗原CD2AP 0.5mgCD2AP (CD2-associated protein)
Ⅴ型膠原(多肽) 0.5mgCollagen V (Anti--Collagen Type V )
ELAVL1/HuR多肽抗原 0.5mgELAVL1/HuR peptide
G蛋白偶聯(lián)受體14抗原 0.5mgUTS2R/GPR14(Urotensin II receptor:G Protein Coupled Receptor 14)
KB抑制蛋白α抗原 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha)
人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA檢測試劑盒耐斯糖 13133-07-8 規(guī)格: 20mg
別隱品堿 485-91-6 規(guī)格: 20mg
沒食子酸丙酯 121-79-9 規(guī)格: 20mg
去甲基川陳皮素 2174-59-6 規(guī)格: 20mg
熒光母素 規(guī)格: 100mg
甲巰咪唑 規(guī)格: 100mg
白樺脂醛 13159-28-9 規(guī)格: 20mg
牛血紅蛋白 9008-02-0 規(guī)格: 5g/支
無水磷酸氫二鈉 規(guī)格: 100mg
焦性沒食子酸 87-66-1 規(guī)格: 100mg
那星 規(guī)格: 100mg
瑞格列奈 135062-02-1 規(guī)格: 100mg
石斛堿 規(guī)格: 約20mg/支
染料木素 446-72-0 規(guī)格: 20mg
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