中文名稱  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
英文名稱   Anti-phospho-E2F1 (Ser364)
濃 度：  1mg/1ml

規(guī) 格  0.1ml/100μg     

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品類型  一抗  磷酸化抗體   

研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 48kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human E2F1 around the phosphorylation site of Ser364

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產(chǎn)品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）

別    名  E2F1 (phospho S364); E2F1 (phospho Ser364); p-E2F1 (S364); p-E2F1 (Ser364); E2F 1; E2F transcription factor 1; E2F-1; E2f1 E2F transcription factor 1; KIAA4009; mKIAA4009; OTTHUMP00000030661; PBR 3; PBR3; PRB binding protein E2F 1; PRB-binding protein E2F-1; RBAP 1; RBAP-1; RBAP1; RBBP 3; RBBP-3; RBBP3; RBP 3; RBP3; Retinoblastoma associated protein 1; Retinoblastoma binding protein 3; Retinoblastoma-associated protein 1; Retinoblastoma-binding protein 3; Transcription factor E2F1; E2F1_HUMAN.

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳suan氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體的制備過程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動物：常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

三乙 CP,75%含RUN域半胱氨豐富域芐氯1相互作用蛋白(Rubicon)ELISA試劑盒轉(zhuǎn)錄中介因子1β檢測試劑盒

三乙 for HPLC,>99.0% (GC)含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)ELISA試劑盒磷化外紡錘體樣蛋白1檢測試劑盒

三乙 ≥99.0% (GC) 含Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激2(Rock2)ELISA試劑盒鳥交換因子檢測試劑盒

三乙 色譜固定液，75℃+++++含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)ELISA試劑盒能受體P2Y11檢測試劑盒

三鹽鹽 98%含PR域蛋白10(PRDM10)ELISA試劑盒血管緊張Ⅰ受體抗體檢測試劑盒

二氟 98%含MOCO硫化羧基端域蛋白1(MOSC1)ELISA試劑盒載脂蛋白L2檢測試劑盒

二溴乙酯 97%含MANSC域蛋白1(MANSC1)ELISA試劑盒蛋白酪氨磷O檢測試劑盒

二氟鈉 97%含Kazal型絲氨蛋白抑制劑域蛋白1(KAZALD1)ELISA試劑盒核糖核蛋白B檢測試劑盒

氟化鋁，三水 AR,98%含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白27(ZFYVE27)ELISA試劑盒鳥檢測試劑盒

氟化鋁，三水 CP,97%含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白26(ZFYVE26)ELISA試劑盒類泛蛋白檢測試劑盒

安息香 CP,98%含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白16(ZFYVE16)ELISA試劑盒非磷化酮脫氫檢測試劑盒

安息香 99.5%含CUB域蛋白1(CDCP1)ELISA試劑盒前膠原賴氨-1,2-酮戊二-5-雙加氧1檢測試劑盒

安息香乙 97%含BED型鋅指蛋白3(ZBED3)ELISA試劑盒血小板糖蛋白V檢測試劑盒

鄰氯 GR,99%含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)ELISA試劑盒血小板衍化生長因子DD檢測試劑盒

N,N-二乙基羥 98%海藻糖(TREH)ELISA試劑盒激活受體樣激1檢測試劑盒
Anti-phospho-E2F1 (Ser364)抗體Anti-Trk B  酪氨激B抗體

Anti-Trk C  酪氨激C抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)

Anti-Trop-2  原肌球蛋白抗體

Anti-TRP2  酪氨相關(guān)蛋白2抗體

Anti-Thioredoxin  硫氧還蛋白抗體

Anti-TRP1/gp75  酪氨相關(guān)蛋白1抗體

Anti-TRPM2  瞬時受體電位離子通道蛋白抗體（M亞家族）

Anti-c/Troponin T  心肌特異性肌鈣蛋白T抗體