試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

服務(wù)：
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488

重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg

腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(腦衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子)（多肽片斷抗原） 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor)

凝血酶原酶 (又稱(chēng)：纖維介素蛋白；前凝血素) 0.5mgfgL2 (Fibrinogen-like 2)

絲裂原活化蛋白激酶激酶 0.5mgMAPKK2

苷酸環(huán)化酶激活肽6-38 0.5mgPACAP(6-38 Peptide)

重組谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶GST標(biāo)簽蛋白 0.1mgr-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents)

CD5 多肽抗原 0.5mgCD5

間隙連接蛋白36抗原 0.5mgCX36 (Connexin-36)

腸道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端) 0.5mgEV71(Human enterovirus 71)VP1(CT)

HA tag標(biāo)簽（分支多肽） 0.5mgHA tag(map)

白介素6 0.5mgIL-6 (Interleukin-6) Human

中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原 0.5mgMK(Midkine)

食欲素受體(多肽) 0.5mgOXR (Orexin receptor)

人凝膠原蛋白(gelson)ELISA檢測(cè)試劑盒大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒 英文名： pACCase ELISA Kit

大鼠磷酸化胰島素受體(pISR1)ELISA試劑盒 英文名： pISR1 ELISA Kit

大鼠磷酸化胰島素受體(phosphorylated ISR)ELISA試劑盒 英文名： phosphorylated ISR ELISA Kit

大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 英文名： AMPK ELISA Kit

大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 英文名： pERK ELISA Kit

大鼠磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)ELISA試劑盒 英文名： pGSK-3 ELISA Kit

大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒 英文名： pIKBα ELISA Kit

大鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)ELISA試劑盒 英文名： p-NF-κB ELISA Kit

大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 英文名： P-PKC ELISA Kit

大鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)ELISA試劑盒 英文名： P-PKB ELISA Kit

大鼠磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)ELISA試劑盒 英文名： pMAPT/pTAU ELISA Kit

大鼠磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1(pCREB1)ELISA試劑盒 英文名： pCREB1 ELISA Kit

大鼠磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)ELISA試劑盒 英文名： PAG1 ELISA Kit

操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。