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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
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大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA檢測(cè)試劑盒

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-02-05 14:30:41瀏覽次數(shù):438次

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大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA檢測(cè)試劑盒特點(diǎn)及用途:敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量,活性或表達(dá)。

服務(wù):
      我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

產(chǎn)品名稱

大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱

 Rat complement fragment 5A (C5a) ELISA Kit

貨號(hào)

 YS-R10920

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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

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大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)ELISA檢測(cè)試劑盒Li-7(人肝細(xì)胞)人淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

德巴利酵母 Debaryomyces occidentalis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

Hce-8693(人盲腸腺細(xì)胞(未分化))蘇云金芽胞桿菌湯普遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. thompsoni

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

黑曲霉 Aspergillus niger拜耳接合酵母 Zygosaccharomyces bailii

大鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris5637(人膀胱細(xì)胞)

阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌

微桿菌屬 Microbacterium sp.RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞)

銅綠假單胞菌* Pseudomonas aeruginosa屎腸球菌 Enterococcus faecium

HuTu-80(人十二脂腸腺)苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe人前列腺細(xì)胞

香菇 Lentinula edodesMM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞

人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

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