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服務:
我們可以根據(jù)您的應用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 兔p53(p53)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rabbit P53 (P53) ELISA Kit |
貨號 | YS-R9547 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
補體C3b抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Complement C3 beta chain
DEPTOR蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:DEPTOR
脫氧核糖核酸酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:DNase I
核糖核酸酶3/Drosha抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Drosha
21號染色體開放閱讀框106抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:C21orf106
DNA酶1樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2m 英文名稱:DNASE1L1
雙特異性蛋白磷酸酶26抗體(絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶8) 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:DUSP26
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-ERF (Thr526)
紅細胞分化相關因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:EDRF1
轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:ELF1
內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:EphA2
CREB結(jié)合蛋白p300抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Ep300
磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-EGFR (Thr693)
豬源產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Escherichka coli K88-K99
兔p53(p53)ELISA檢測試劑盒銀杏內(nèi)酯C 15291-76-6 規(guī)格: 20mg
香葉木苷;地奧斯明 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
柴胡皂苷A 20736-09-8 規(guī)格: 20mg
異型南五味子丁素 規(guī)格: 20mg
右旋四氫巴馬汀 3520-14-7 規(guī)格: 20mg
紫草素 517-89-5 規(guī)格: 20mg
紫菀 10376-48-4 規(guī)格: 20mg
血根堿 2447-54-3 規(guī)格: 20mg
薄荷腦 1490-04-6 規(guī)格: 20mg
兒茶素 154-23-4 規(guī)格: 20mg
刺囊酸 510-30-5 規(guī)格: 20mg
五靈脂對照藥材 規(guī)格: 1g
木犀草苷 1268798 規(guī)格: 20mg
麥芽糖 69-79-4 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
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