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動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒免疫組化抗原修復(fù)方法

閱讀:101發(fā)布時(shí)間:2017-9-8

動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒組織在開始染色之前都需要先修復(fù)抗原,這是由于在固定過程中產(chǎn)生了亞甲基橋使蛋白之間交聯(lián)屏蔽了抗原位點(diǎn)。兩種抗原修復(fù)方法為熱修復(fù)法(稱之為熱誘導(dǎo)抗原表位修復(fù)或HIER)和酶解法。

一、熱修復(fù)法

1. 熱修復(fù)緩沖溶液

下面是三種HIER較為常用的緩沖溶液,對(duì)于一個(gè)特定的抗體,在沒有其他研究者建議的情況下,要通過實(shí)驗(yàn)確定選用哪種修復(fù)緩沖液。

1)  *緩沖液(10 mM Sodium Citrate,0.05% 吐溫- 20, pH 6.0)

2) 1 mM EDTA, 調(diào)至pH 8.0

3) Tris/EDTA 緩沖液(10mM Tris, 1 mM EDTA 溶液, 0.05% 吐溫-20, pH 9.0)

2. 熱修復(fù)方法

a) 高壓蒸汽法

玻片要置于金屬架上

1)材料及試劑

• 家用不銹鋼高壓鍋

• 加熱板

• 玻片架放置容器(容量大約400-500ml)

• 抗原修復(fù)緩沖液(如Tris/EDTA pH 9.0,*pH 6.0)

2)方法

1. 動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒將合適的抗原修復(fù)緩沖液加入高壓鍋內(nèi),然后將鍋置于加熱板并開至zui大功率,此時(shí)不要把蓋子蓋緊。在等待煮沸過程中,進(jìn)行脫蠟至水。

2.煮沸后,將玻片從自來(lái)水中取出放入高壓鍋內(nèi)。小心熱溶液- 使用鑷子。依照說(shuō)明書加上加壓閥。

3.高壓鍋達(dá)到zui大壓力后,維持3分鐘。

4.3分鐘過后,關(guān)掉加熱板,將高壓鍋取下放置。

5.打開高壓鍋閥門,冷水冷卻鍋身。壓力降下后,打開鍋蓋,冷水冷卻10分鐘。

6.繼續(xù)染色。
140739-200501    規(guī)格:    40mg    *:    HPLC法含量測(cè)定    苯乙酰*
140746-200801    規(guī)格:    10mg    *:    檢查    氧化型*
140747-201001    規(guī)格:    50mg    *:    鑒別    *
140749-200701    規(guī)格:    50mg    *:    HPLC法含量測(cè)定    **
140750-200701    規(guī)格:    20mg    *:    HPLC法含量測(cè)定    *
140751-200701    規(guī)格:    6U    *:    鑒別    *
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒

 


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