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閱讀:119發(fā)布時間:2017-11-23
在進口原裝elisa試劑盒方法技術(shù)中,首先要確定的變異因素就是酶標(biāo)記物的工作濃度。因為酶標(biāo)記物濃度的很小的一個變化,便會導(dǎo)致整個試驗結(jié)果產(chǎn)生很大的波動。另外,由于濃度過高,會使非特異性反應(yīng)增加,而濃度過低又會影響測定的敏感性。因此,在正式準(zhǔn)備試驗前必須準(zhǔn)確滴定其工作濃度,才能完善整個實驗。
1. 酶標(biāo)記抗體的滴定方法是:將抗原(或抗體)物理吸附于固相載體上,然后將經(jīng)過一系列稀釋的酶標(biāo)抗體(或抗Ig抗體)與吸附在載體上的抗原(或抗體)起反應(yīng),以酶與底物的顯色反應(yīng)程度來確定酶標(biāo)記抗體的效價,或稱工作濃度。
2. 其步驟為:先將抗原(或抗體)用0.05M PH9.6包被緩沖液稀釋為10μg/ml左右,于聚苯乙烯板孔內(nèi)加0.1ml,4℃一夜,次日以洗滌緩沖液洗滌3次。酶標(biāo)記抗體用1%BSA-PBS液依次稀釋成1:100,1:200,1:400,1:800,1:1600(根據(jù)據(jù)抗體的滴度而定),分別加入反應(yīng)孔中,每個稀釋度二孔,每孔0.1ml,37℃孵育1小時后洗滌。然后加底物液,每孔0.1ml,37℃10~30分鐘。以2M H2SO4 0.05ml終止反應(yīng)。
3. 結(jié)果判定主要是以進口原裝elisa試劑盒比色儀(酶標(biāo)儀)讀取各孔的OD值,并以O(shè)D為縱座標(biāo),結(jié)合物濃度為橫座標(biāo),繪制滴定曲線。由曲線上查得OD值為1.0左右,且曲線斜率zui大時的酶標(biāo)抗體稀釋度,即為該標(biāo)記物的工作濃度。
Benzoyloxypeoniflorin 苯甲酰氧化芍藥苷 20mg 72896-40-3
Benzoylmesaconine 苯甲酰新烏頭原堿 20mg 63238-67-5
Benzoylaconine 苯甲酰烏頭原堿 10mg 466-24-0
Benzoylpaeoniflorin 苯甲酰芍藥苷 20mg 38642-49-8
Benzoylhypacoitine 苯甲酰次烏頭原堿 20mg 63238-66-4
Benzoic acid 苯甲酸 20mg 65-85-0
Peimisine 貝母辛 10mg 19773-24-1
Peiminine 貝母素乙 20mg 18059-10-4
Peimine 貝母素甲 20mg 23496-41-5
進口原裝elisa試劑盒
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