上海一研生物科研有限公司
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更新時間:2017-04-07 10:38:25瀏覽次數(shù):100次
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人肺癌細(xì)胞;Calu-1運(yùn)輸采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
細(xì)胞名稱 人肺癌細(xì)胞;Calu-1運(yùn)輸
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 超微結(jié)構(gòu)特征包括眾多微絨毛,顯著的RER(粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)),溶酶體,脂包含體,無病毒顆粒。 含ras (H-ras)癌基因。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化10分鐘。1:2。3-4天長滿
傳代情況 P(25+5)
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人肺癌細(xì)胞;Calu-1運(yùn)輸冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人肺癌細(xì)胞;Calu-1運(yùn)輸操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買人肺癌細(xì)胞;Calu-1運(yùn)輸注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
FastDigest® NspI (XceI) 50 reactSgsI (AscI) 300 units
FastDigest® KpnI 300 reactSgsI (AscI) 1500 units
FastDigest® BbsI (BpiI) 20 reactCseI (HgaI) 100 units
CloneJET™ PCR Cloning Kit 40 reactEcoRII 200 units
BstXI 500 unitsLguI (SapI) 100 units
FastDigest® BclI 300 reactLguI (SapI) 500 units
TscAI (TspRI) 1000 unitsAjiI (BmgBI) 200 units
GeneRuler™ 100 bp Plus DNA Ladder 5x50 µgAjuI 100 units
MboII 1500 unitsPpu21I (BsaAI) 500 units
BplI 500 unitsSmoI (SmlI) 200 units
RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit 20 rxnsRseI (MslI) 200 units
BspTI (AflII) 1000 unitsRseI (MslI) 1000 units
南山花Prismatomeris tetrandra Quinovin 尚含雞納甙 107870-05-3 C36H56O9 ≥95%30636-90-9 (S型)原人參二醇 PROTOPANAXDIOL 460.73208 C30H52O3
水杉Metasequoia glyptostroboides Metasequirin D (2S,3S,4E)-3,5-雙(4-羥基-3-甲氧基苯基)-4-戊烯-1,2-二醇 1264694-96-3 C19H22O6 ≥95%1,1',6,6',7,7'-Hexahydroxy-5,5'-diisopropyl-3,3'-dimethyl-[2,2'-binaphthalene]-8,8'-dicarbaldehyde 棉酚 303-45-7 518.55
蘿芙木Rauvolfia verticillata Venoterpine (6S,7R)-6,7-二氫-7-甲基-5H-環(huán)戊并[C]吡啶-6-醇 17948-42-4 C9H11NO ≥95%17912-87-7 楊梅苷 3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-5,7-dihydroxy-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)-4H-benzopyran-4-one 464.3763 C21H20O12
* Nicotinamide 98-92-0 122.13 C6H6N2O云木香Saussurea lappa Ascleposide E 4-[(1S,3S,5R,8R)-3-(beta-D-吡喃葡糖氧基)-1,5-二甲基-6-氧雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基]-2-丁酮 325686-49-5 C19H32O8 ≥95%
闊帶鳳丫蕨Coniogramme maxima Pteroside D 蕨甙 D 35943-38-5 C21H30O8 ≥98%鹽膚木Rhus chinensis Garbanzol 3,4',7-三羥基黃烷酮 1226-22-8 C15H12O5 ≥95%
梭砂貝母酮堿;新貝甲素 1358-76-5 鉤吻素子 7,20(2H,19H)-Cyclovobasan, 1,2,18,19-tetradehydro-3,17-epoxy-, (3R,7alpha,20alpha)- 306.40148 C20H22N2O
刺桐Erythrina arborescens 1"-Methoxyerythrinin C 1"-甲氧基刺桐素 C 221002-11-5 C21H20O7 ≥95%木犀草素 Luteolin 491-70-3 286.24 C15H10O6
飛龍掌血Toddalia asiatica Artanin none 96917-26-9 C16H18O5 ≥95%ginsenoside rc 人參皂苷Rc 11021-14-0 1079.27 C53H90O22
Caffeine 21399 鉤吻Gelsemium elegans Gelsempervine A 16-表-NB-甲基伏康樹卡平堿 865187-17-3 C22H26N2O4 ≥95%
人肺癌細(xì)胞;Calu-1運(yùn)輸asiatic acid 積雪草酸 464-92-6 488.7 C30H48O5Phellodendrine chloride 黃柏堿 6873-13-8 342.40886 C20H24NO4+
Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside(:60213-69-6) 60213-69-6 750 C41H66O12魚子蘭Chloranthus elatior 1-(3,4-Dimethoxyphenyl)propane-1,2-diol 1-(3,4-二甲氧基苯基)丙烷-1,2-二醇 20133-19-1 C11H16O4 ≥96%
保亭哥納香Goniothalamus griffithii Griffithazanone A (3R,4R)-3,4-二氫-3-羥基-4-甲基苯并[G]喹啉-2,5,10(1H)-三酮 240122-30-9 C14H11NO4 ≥95%菌類Fungi Enniatin B1 恩鐮孢菌素B1 19914-20-6 C34H59N3O9 ≥96%
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