上海一研生物科研有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-06-12 14:17:11瀏覽次數(shù):132次
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cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次??品牌產(chǎn)品特點:離心柱法;安全:無需使用二甲苯去蠟,具有安全、有效的*去蠟方法;高質(zhì)量:提取的RNA純度高,得率高;方便:操作簡單、快捷,無需*類有毒試劑,無需乙醇沉淀。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實驗人員,保證您cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次??品牌的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實驗進程。
cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次??品牌的詳細介紹:
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
服務(wù)流程
1)客戶提供材料
2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質(zhì)
客戶提供
●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細胞、細菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝)
●詳細的背景資料:來源、特點、類型等
我們提供
基因組RNA/DNA提取、實驗報告
質(zhì)量保證
高純度RNA/DNA、完整性
貨期
3-5個工作日
wound repair. Probably regulates NF-kappa-B APC, AXIN1, CTNNB1 and GSK3B.
Subcellular Location : Cytoplasm. Nucleus. Cell membrane. Note=The phosphorylated form shows localization to cytoplasm and cell membrane. The MEMO1-RHOA-DIAPH1 signaling pathway controls localization of the phosophorylated form to the cell membrane.
Tissue Specificity : Expressed in testis, thymus, prostate and ovary and weakly expressed in lung, brain and kidney.
Post-translational modifications : Phosphorylated by AKT1 and ILK1. Upon insulin-mediated signaling, the activated PKB/AKT1 protein kinase phosphorylates and desactivates GSK3B, resulting in the dephosphorylation and activation of GYS1. Activated by phosphorylation at Tyr-216.
Similarity : Belongs to the protein kinase superfamily. CMGC Ser/Thr protein kinase family. GSK-3 subfamily.
Contains 1 protein kinase domain.
Database links :
UniProtKB/Swiss-Prot: P49841.2
Entrez Gene: 2932 Human PPAR gamma 2 過氧化酶活化增生受體γ2試劑盒
Protor-1 癌抑制基因Protor1試劑盒
POT1 端粒保護蛋白1試劑盒
PCANAP2 前列腺癌相關(guān)蛋白2試劑盒
PCMT1 天*甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT試劑盒
PRSS3 腦*3試劑盒
PTK9 蛋白*激酶9試劑盒
PLAC8 胎盤特異基因8蛋白試劑盒
PDLIM3 輔肌動蛋白相關(guān)LIM蛋白試劑盒
PROK2 前動力蛋白2試劑盒
PBOV1 前列腺癌和癌高表達蛋白試劑盒
PHLP 腫瘤抑制基因PHLPP試劑盒
PRODH *脫氫酶試劑盒
PSMD8 蛋白酶調(diào)解因子8試劑盒
Protein C inhibitor 蛋白C抑制因子試劑盒
PCDHGB5 原鈣粘蛋白γB5試劑盒
Proteasome 20S alpha 5 蛋白酶體PSMα5試劑盒
PNPLA6 含patatin樣磷脂酶6試劑盒
Plexin A4 神經(jīng)叢蛋白A4試劑盒
PLAGL2 多形性腺瘤基因樣蛋白2試劑盒
PCGF1 表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白試劑盒
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