上海一研生物科研有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-06-13 16:00:20瀏覽次數(shù):177次
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即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù)產(chǎn)品特點:離心柱法;安全:無需使用二甲苯去蠟,具有安全、有效的*去蠟方法;高質(zhì)量:提取的RNA純度高,得率高;方便:操作簡單、快捷,無需*類有毒試劑,無需乙醇沉淀。
公司提供的RNA/DNA 提取,完善的實驗條件,*的設(shè)備,高素質(zhì)的實驗人員,保證您即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù)的實驗得以良好的完成。我們承諾一對一的專門服務(wù),您可以全稱參與了解實驗進程。
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù)的詳細介紹:
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù)操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù)服務(wù)流程
1)客戶提供材料
2)提取基因組RNA/DNA并確定其品質(zhì)
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù)客戶提供
●新鮮材料或正確保存條件下材料(組織、細胞、細菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一個月,-80℃保存一年血液樣品(EDTA,肝素,檸檬酸鈉抗凝)
●詳細的背景資料:來源、特點、類型等
我們提供
基因組RNA/DNA提取、實驗報告
質(zhì)量保證
高純度RNA/DNA、完整性
貨期
3-5個工作日
phosphorylation of multiple substrates, that function as signaling adapter proteins including, the insulin-receptor substrates (IRS1/2), Shc and 14-3-3 proteins. Phosphorylation of IRSs proteins lead to the activation of two main signaling pathways: the PI3K-AKT/PKB pathway and the Ras-MAPK pathway. The result of activating the MAPK pathway is increased cellular proliferation, whereas activating the PI3K pathway inhibits apoptosis and stimulates protein synthesis. Phosphorylated IRS1 can activate the 85 kDa regulatory subunit of PI3K (PIK3R1), leading to activation of several downstream substrates, including protein AKT/PKB. AKT phosphorylation, in turn, enhances protein synthesis through mTOR activation and triggers the antiapoptotic effects of IGFIR through phosphorylation and inactivation of BAD. In parallel to PI3K-driven signaling, recruitment of Grb2/SOS by phosphorylated IRS1 or Shc leads to recruitment of Ras and activation of the ras-MAPK pathway. In addition to these two main signaling pathways IGF1R signals also through the Janus kinase/signal transducer and activator of試劑名稱:N,N-二甲基*鹽酸鹽
NO.:2491-6-7
分子式:C4H9NO2.HCl
分子量:139.5807
英文名稱:N,N-Dimethylglycine hydrochloride
1367純度:99%
試劑名稱:2-羰基丁酸鈉鹽
NO.:2013-26-5
分子式:C4H5NaO3
分子量:124.07
英文名稱:ALPHA-KETOBUTYRIC ACID SODIUM SALT
1437純度:98%
試劑名稱:4-N,N-二甲基氨基偶氮苯-4`-異硫氰酸酯
即用型藍白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次售后服務(wù) NO.:7612-98-8
分子式:C15H14N4S
分子量:
英文名稱:4-[(4-isothiocyanatophenyl)azo]-N,N-dimethylaniline
1153純度:97%
試劑名稱:1,4-二羥基萘
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