ELISA試劑盒頂用ELISA檢測時（以檢測弓漿蟲IgM為例），用無特異抗體的血清稀釋陽性血清制作規(guī)范曲線，挑選的稀釋度應很容易差異陽性和暗影成果的稀釋度。每次實驗均應同時使用陰性對照血清，可挑選強陽性的血清作為規(guī)范對照血清，并可自己設定其為100單位（免疫酶單位-EIU）。這樣每次實驗均參閱陽性血清成果斷定每份血清的相對抗體水平，其核算公式如下：標本值-陰性對照值 陽性對照值-陰性對照值
抗體水平（樣本）=（規(guī)范值-陰性對照值）/（陽性對照值-陰性對照值）×EIU
用在450nm檢測的吸光度核算，zui終的值為EIU。
如果國內或上的規(guī)范抗體和檢測辦法，那么所用的參閱血清應與規(guī)范血清對照實驗進行規(guī)范化，但如果所用的檢測辦法不同，規(guī)范化時就存在不同，不同的辦法檢測出的成果不能反映出參閱血清和規(guī)范血清之間的不同。
ELISA試劑盒自己制備的規(guī)范參閱血清應確保質量，并要有滿足的血清，小量分裝存儲與-20℃，或凍干存儲。規(guī)范血清檢測的吸光度值應確保在必定范圍內，以便檢測每次實驗的吸光度值的改變。
