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閱讀:99發(fā)布時間:2017-8-7
ELISA試劑盒頂用ELISA檢測時(以檢測弓漿蟲IgM為例),用無特異抗體的血清稀釋陽性血清繪制規(guī)范曲線,選擇的稀釋度應(yīng)很簡單差異陽性和暗影成果的稀釋度。每次實驗均應(yīng)同時運(yùn)用陰性對照血清,可選擇強(qiáng)陽性的血清作為規(guī)范對照血清,并可自己設(shè)定其為100單位(免疫酶單位-EIU)。這樣每次實驗均參閱陽性血清成果斷定每份血清的相對抗體水平,其核算公式如下:標(biāo)本值-陰性對照值 陽性對照值-陰性對照值
抗體水平(樣本)=(規(guī)范值-陰性對照值)/(陽性對照值-陰性對照值)×EIU
用在450nm檢測的吸光度核算,zui終的值為EIU。
ELISA試劑盒如果國內(nèi)或上的規(guī)范抗體和檢測辦法,那么所用的參閱血清應(yīng)與規(guī)范血清對照實驗進(jìn)行規(guī)范化,但如果所用的檢測辦法不同,規(guī)范化時就存在不同,不同的辦法檢測出的成果不能反映出參閱血清和規(guī)范血清之間的不同。
自己制備的規(guī)范參閱血清應(yīng)保證質(zhì)量,并要有滿足的血清,小量分裝存儲與-20℃,或凍干存儲。規(guī)范血清檢測的吸光度值應(yīng)保證在一定范圍內(nèi),以便檢測每次實驗的吸光度值的變化。
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