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上海機(jī)純實(shí)業(yè)有限公司


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C-33A細(xì)胞-化學(xué)試劑

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:胡珍珍查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2017-07-24 13:42:39瀏覽次數(shù):85次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研    

C-33A細(xì)胞經(jīng)過多年的磨練打拼,如今倍受廣大科研者們以及經(jīng)銷商的青睞,豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,所有這些保證了我們向您提供的*的服務(wù)。

詳細(xì)介紹

C-33A細(xì)胞
細(xì)胞介紹:    
該細(xì)胞系由AuerspergN建立,源于活檢標(biāo)本。p53+,pRB+,在273位密碼子發(fā)生點(diǎn)突變。
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),90%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào) 16000-044),10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度 為 70%-80%。
3. 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低 于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培 養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
C-33A細(xì)胞細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。力口2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部 分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的 培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養(yǎng)液后吹勻。移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

細(xì)胞特性:
1)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
2)含量:>lxl06 個(gè)/mL
3)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
4)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝

細(xì)胞接受后的處理:
1.收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2.請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4. 如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?br />細(xì)胞用途:僅供科研使用。

關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 顯微鏡

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