MDA-MB-231細胞
細胞介紹：
MDA-MB-231是從一名51歲的白人女性癌患者的胸水中分離建立的。該細胞表達表皮生長因子EGF受體、TGF- a受體和WNT7B癌基因。
細胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1.準備 DMEM-H 培養(yǎng)基(DMEM-H，GIBCO,貨號 12800017,添加 NaHC031.5g/L)， 90%;胎牛血清，10%。（DMEM 液體培養(yǎng)基：GIBCO，11995-065)。
2.培養(yǎng)條件：37攝氏度氣相：空氣，。
3. 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復(fù)蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤雔〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
MDA-MB-231細胞細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止 消化。按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進行凍存。
注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
細胞特性：
1)來源：癌
2)形態(tài)：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存：使用T25瓶充液發(fā)送活細胞。收到細胞后，請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態(tài)，并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過夜后，再次檢查細胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，可按照以下細胞培養(yǎng)步驟進行細胞后續(xù)處理操作。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物，請及時與我們?nèi)〉谩?br />細胞用途：僅供科研使用。
