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雞胚成纖維細(xì)胞(UMNSAH/DF-1)-化學(xué)試劑

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-07-25 13:45:39瀏覽次數(shù):103次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研    

雞胚成纖維細(xì)胞(UMNSAH/DF-1)是我公司重點(diǎn)推廣產(chǎn)品,我們有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo),請(qǐng)放心購(gòu)買(mǎi),發(fā)貨時(shí)均會(huì)附上質(zhì)檢報(bào)告單、使用說(shuō)明書(shū)和*用法用量,提供正規(guī)發(fā)票。

詳細(xì)介紹

雞胚成纖維細(xì)胞(UMNSAH/DF-1)
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞是起源于10日齡的ELL-0雞蛋的雞細(xì)胞株,自發(fā)永生化。分離原代雞胚成纖維細(xì)胞并在培養(yǎng)液中培養(yǎng);傳代直到衰老;在衰老過(guò)程中離心以保持細(xì)胞培養(yǎng)在30%到60%滿;不衰老的克隆進(jìn)行鑒定并傳代不少于30次。在軟瓊脂上沒(méi)有觀察到克隆增殖,說(shuō)明這些細(xì)胞是永生化而沒(méi)有轉(zhuǎn)化。該細(xì)胞可作為病毒增殖、組蛋白表達(dá)和重組病毒生產(chǎn)的基質(zhì)。

細(xì)胞特性
1)來(lái)源:雞胚
2)形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng)
3)含量:>lxl06 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝

細(xì)胞接受后的處理:
1.收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2.請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4.如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?/p>

雞胚成纖維細(xì)胞(UMNSAH/DF-1)細(xì)胞用途:僅供科研使用。
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號(hào)11995-065),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培
養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部
分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養(yǎng)液后吹勻。
移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO
至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

雞胚成纖維細(xì)胞(UMNSAH/DF-1)注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

關(guān)鍵詞:顯微鏡 培養(yǎng)箱

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