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人膽管癌細(xì)胞（QBC-939）-化學(xué)試劑

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上海機(jī)純實(shí)業(yè)有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

產(chǎn)地	國(guó)產(chǎn)	加工定制	是
適用領(lǐng)域	科研

人膽管癌細(xì)胞（QBC-939）是我公司重點(diǎn)推廣產(chǎn)品，我們有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導(dǎo)，請(qǐng)放心購(gòu)買，發(fā)貨時(shí)均會(huì)附上質(zhì)檢報(bào)告單、使用說(shuō)明書(shū)和*用法用量，提供正規(guī)發(fā)票。

詳細(xì)介紹

人膽管癌細(xì)胞(QBC-939)
細(xì)胞介紹：
該細(xì)胞由第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院建系于1997年，細(xì)胞來(lái)源于一位接受了肝膽手術(shù)的肝外膽管癌患者。

細(xì)胞特性
1)來(lái)源：肝外膽管腫瘤
2)形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)
3)含量：>lxl06 個(gè)/mL
4)污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存：使用T25瓶充液發(fā)送活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，請(qǐng)先在顯微鏡下檢查細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過(guò)夜后，再次檢查細(xì)胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好，可按照以下細(xì)胞培養(yǎng)步驟進(jìn)行細(xì)胞后續(xù)處理操作。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?。?xì)胞用途：僅供科研使用。

人膽管癌細(xì)胞(QBC-939)細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
2.準(zhǔn)備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號(hào) 31800022,添加 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸鈉O.llg八)，90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%?；驕?zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(GIBCO，貨號(hào)11995-065)，90%;胎牛血清，10%;雙抗，1%。
3.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
4.凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

2)細(xì)胞處理：
復(fù)蘇細(xì)胞：將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進(jìn)行凍存。

人膽管癌細(xì)胞(QBC-939)注意事項(xiàng)：
收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

關(guān)鍵詞：顯微鏡培養(yǎng)箱