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小鼠成纖維細胞（L-929）-化學試劑

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更新時間：2017-07-26 11:15:43瀏覽次數(shù)：133次

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產(chǎn)品簡介

產(chǎn)地	國產(chǎn)	加工定制	是
適用領(lǐng)域	科研

小鼠成纖維細胞（L-929）是我公司重點推廣產(chǎn)品，我們有專業(yè)的技術(shù)人員全程指導，請放心購買，發(fā)貨時均會附上質(zhì)檢報告單、使用說明書和*用法用量，提供正規(guī)發(fā)票。

詳細介紹

小鼠成纖維細胞(L-929)
細胞介紹
1948年三月建立了NCTCclone929(小鼠結(jié)締組織)，細胞系L的克隆。細胞系L是zui早建立的連續(xù)培養(yǎng)細胞系之一，而clone929是zui早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細胞系L。第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了 clone929。檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。

細胞特性
1)來源：組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪品系：C3H/An
2)形態(tài)：成纖維細胞
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：（1)干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇；（2)存活細胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
小鼠成纖維細胞(L-929)細胞用途：僅供科研使用。

細胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1.準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBC0,貨號11095-080)，90%;優(yōu)質(zhì)馬血清(GIBC0,貨號16050-122)，10%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3. 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤雔0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

小鼠成纖維細胞(L-929)注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱顯微鏡