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人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟

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人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟
培養(yǎng)的前一周內(nèi)出現(xiàn)質(zhì)量問題, 客戶可憑細(xì)胞的照片以及書面形式的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過程提供給我公司。 經(jīng)公司技術(shù)人員核實(shí)認(rèn)定為可以予以重發(fā)的情況,由公司再免費(fèi)提供一次細(xì)胞。

公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、技術(shù)培訓(xùn)、人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟
售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫(kù),以及部分國(guó)內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟
形態(tài)特性  成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  人胚肺二倍體細(xì)胞,來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%
傳代方法  1:2-1:4
傳代情況 P21
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:X; D7S820:8,11;CSF1PO:10,12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:14,17;D21S11:29,30;D3S1358:15;D5S818:11;D8S1179:11,13;FGA:19,22;PentaD:11,13;PentaE:7,11;TH01:7,9;TPOX:8,10;vWA:18
同工酶 人B,NP,G7PG,MD,AST
染色體
使用權(quán)限 A類人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟
處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請(qǐng)及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請(qǐng)及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購(gòu)買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購(gòu)買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒 ATF6(activating transcription factor 6)  活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原 Hsp-40 ELISA Kit
小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒 ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide)  鈉鉀ATP酶通道蛋白抗原 HSP-27 ELISA Kit
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA試劑盒 Kir6.2 peptide  ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原 Hsp-20 ELISA Kit
小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒 AVPR2(arginine vasopressin receptor 2)  *加壓素受體2抗原 IMA ELISA Kit
小鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 Aurora B  極光激酶B抗原 ALD ELISA Kit
小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 Nociceptin  孤菲肽(痛敏肽)(抗原) i-PTH ELISA Kit
小鼠*(NE)ELISA試劑盒 B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1)  程序性死亡配體1(多肽) NE ELISA Kit
小鼠*(NA)ELISA試劑盒 Nociceptin receptor  孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原) NA ELISA Kit
小鼠趨化因子配體1(CCL1)ELISA試劑盒 Nogo-A  軸索過度生長(zhǎng)抑制因子-A(抗原) CCL1 ELISA Kit
小鼠趨化因子5(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒 Nogo-66 1-40  Nogo-66 (1-40) CCL5/RANTES ELISA Kit
小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 Nogo R  軸索過度生長(zhǎng)抑制因子受體(多肽抗原) fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit
小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒 Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)  相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原 FK ELISA Kit
小鼠趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)ELISA試劑盒 Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)  相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原 MRC2 ELISA Kit
小鼠羥*(Hyp)ELISA試劑盒 phospho-BAD(pSer128)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 Hyp ELISA Kit
小鼠羥甲基戊二酸單酰*還原酶(HMG-CoAR)ELISA試劑盒 Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)  Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽) HMG-CoAR ELISA Kit
小鼠羥甲基戊二酸單酰*(HMG-CoA)ELISA試劑盒 NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)  一氧化氮合成酶-1(抗原) HMG-CoA ELISA Kit
小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible  一氧化氮合成酶-2(抗原) Pro-ANP ELISA Kit
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒 Batroxobin  蛇毒巴曲酶抗原 PSA ELISA Kit
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒 NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS  一氧化氮合成酶-3(抗原) PAP ELISA Kit
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS操作步驟
小鼠前列腺素G/H合酶1(PTGS1)ELISA試劑盒 NPY ( Neuropeptide Y)  神經(jīng)肽 Y(抗原) PTGS1 ELISA Kit
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒 NR2B (Glutamate receptor)  *受體(抗原) PGF ELISA Kit
小鼠前列腺素E2合成酶(PGES)ELISA試劑盒 NT-3  神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原) PGES ELISA Kit
小鼠前列腺素E2(PGE-2)ELISA試劑盒 NT-4,NT-5  神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5(抗原) PGE-2 ELISA Kit
小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒 NTN (Neurturin)  神經(jīng)生長(zhǎng)因子(抗原) PGE2 ELISA Kit
小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)  Bcl-xL蛋白抗原 PGE1 ELISA Kit
小鼠前列腺素D2(PGD2)ELISA試劑盒 phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)  磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原 PGD2 ELISA Kit
小鼠前列環(huán)素(PGI2)ELISA試劑盒 BCHE(butyrylcholinesterase)NT  丁酰*脂酶抗原(N端) PGI2 ELISA Kit
小鼠前白蛋白(PA)ELISA試劑盒 BCHE(butyrylcholinesterase)CT  丁酰*脂酶抗原(C端) PA ELISA Kit
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 Nurr1  核受體相關(guān)因子-1(抗原) GIP ELISA Kit
 

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