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更新時間:2017-06-04 17:14:49瀏覽次數(shù):112次
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公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復蘇及凍存細胞及相關(guān)技術(shù)服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、小鼠雜交瘤細胞;1H6技術(shù)培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內(nèi)外細胞研究機構(gòu)建系。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;1H6
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠雜交瘤細胞;1H6處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應的細胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
203℃,大吸收波長 498nm
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酯酶底物,用于組織化學檢驗。熒光基質(zhì)?;罴毎旧米骷毎麅?nèi)相互作用及其(細胞)膜滲透性的研究。FDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內(nèi)。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488 nm和530 nm。
〖保存〗:-20℃,避光
二熒光素
〖英文名稱〗:Fluorescein dichloride;2′,7′-Dichlorofluorescein
〖其他名稱〗:2ˊ,7ˊ-二熒光素;2ˊ,7ˊ-二熒光黃;2',7'-二-3',6'-二羥基螺[異苯并呋喃-1(3H),9'-(9H)占噸]-3-酮;2,7-二-3,6-螢烷二醇
〖號〗:76-54-0
C20H10Cl2O5=401.20
〖級別〗:試劑級
純度:≥95%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色或橙褐色粉末或固體?!既埸c〗280℃,微溶于水 (0.1-1%),微溶于DMSO,溶于甲醇和乙醇(乙醇溶解:25mg/ml)、堿
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)熒光指示劑。吸附指示劑,如以Ag-NO3滴定C1-點由黃綠色變?yōu)榈t色
〖保存〗:RT,保質(zhì)期4年
3',6'-二熒光素
〖英文名稱〗:3',6'-Dichlorofluoran;Fluorescein dichloride
〖其他名稱〗:3ˊ,6ˊ-二熒光橙紅;3ˊ,6ˊ-二熒光紅;3ˊ,6ˊ-二熒光黃;3ˊ,6ˊ-二熒烷;化熒光素
〖號〗:630-88-6
C20H10Cl2O3=369.2
〖級別〗:BR
純度:≥90%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:橙色粉末。溶于乙醇,不溶于水或酸
小鼠雜交瘤細胞;1H6〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT,保質(zhì)期5年
3,3-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽無水物
〖英文名稱〗:DAB·4HCL;3,3-Diamonobenzidine tetrahydrchloride;3,3',4,4'-Biphenyltetramine tetrahydrochloride
〖其他名稱〗:3,4,3′,4′-四氨基聯(lián)苯四鹽酸鹽;硒試劑;3,3-二氨基聯(lián)苯胺鹽酸鹽;(1,1'-聯(lián)苯)-3,3'4,4'-四胺四鹽酸鹽;鹽酸-3,3′-二氨基聯(lián)苯胺
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