Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565

公司專注于細胞培養(yǎng)及細胞銷售的細胞生物學技術研發(fā)的高科技企業(yè)，主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務，公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565技術培訓、售后服務，其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫，以及部分國內外細胞研究機構建系。

細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：7,10；D12S391：17,20；D13S317：10,13；D16S539：11,14；D18S51：17,18；D19S433：12,12；D21S11：29,30；D2S1338：16,16；D3S1358：12,17；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：11,12；D8S1179：12,14；FGA：18,23；Penta E：13,14；TH01：8,9；TPOX：8,8；vWA：18,22；
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565處理方法
1、用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的）培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基，若出現渾濁情況，請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察，如有污染，請及時。
4、嚴格無菌操作，拆下封口膜，如果細胞的量較少，可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞量足夠，可進行離心收集細胞，用1×PBS洗兩遍，加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃，5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象，建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細胞為凍存狀態(tài)，可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動，盡快解凍。解凍后，用75%酒精將凍存管擦拭干凈，用吸管吸出細胞懸液，放入培養(yǎng)瓶中，再加入相應的細胞培養(yǎng)液，放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)知識：
1.應如何避免細胞污染？
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數目太少之情形？
研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少， 大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性 損傷， 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？
研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳， 常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？
冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。緩激肽(BK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bradykinin (BK)48T/96T
纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Fibrinogen Beta (FGb)48T/96T
松弛肽(RLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Relaxin (RLN)48T/96T
TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)48T/96T
激素脫落酸(ABA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Abscisic Acid (ABA)48T/96T
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Placeal (ALPP)48T/96T
接觸蛋白關聯(lián)蛋白樣蛋白4(CNAP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Coactin Associated Protein Like Protein 4 (CNAP4)48T/96T
糖抗原50(CA50)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Carbohydrate Aigen 50 (CA50)48T/96T
突觸核蛋白α(SNCα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa)48T/96T
神經細胞黏附分子(NCAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM)48T/96T
抗補體1q抗體(Ai-C1q)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ai-Compleme 1q Aibody (Ai-C1q)48T/96T
胃泌素(GT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Gastrin (GT)48T/96T
毒蕈堿型*受體M4(CHRM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 4 (CHRM4)48T/96T
MAX基因關聯(lián)蛋白A(MgA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for MAX Gene Associated Protein (MgA)48T/96T
細胞毒性T-淋巴細胞關聯(lián)抗原4(CTLA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Aigen 4 (CTLA4)48T/96T
角蛋白18(KRT18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18)48T/96T
細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE)48T/96T
周期素依賴性激酶4(CDK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclin Depende Kinase 4 (CDK4)48T/96T
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)48T/96T
毒蕈堿型*受體M5(CHRM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 5 (CHRM5)48T/96T
纖溶酶原(Plg)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)膠質細胞系來源神經營養(yǎng)因子(GDNF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Plasminogen (Plg)48T/96T
纖維蛋白肽A(FPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)膠質細胞系來源神經營養(yǎng)因子(GDNF)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit