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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;M-860

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更新時(shí)間:2017-06-08 18:59:58瀏覽次數(shù):123次

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公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、小鼠雜交瘤細(xì)胞株;M-860技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;M-860
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;M-860處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識:
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
欲點(diǎn)樣的位置用〖鉛〗筆做上記號,點(diǎn)上樣品,在一定的電壓,電流下電泳一定時(shí)間,取下濾膜,進(jìn)行染色。不同物質(zhì)需采用不同的顯色方法,如核苷酸等物質(zhì)可在紫外分析燈下觀察定位,但許多物質(zhì)必須經(jīng)染色劑顯色
〖保存〗:RT
PVDF膜
〖英文名稱〗:Polyvinylidene Fluoride Membrane
〖其他名稱〗:二氟化樹脂膜
〖包裝〗:13.5×15cm/張
孔徑:0.2um
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:聚偏二氟乙烯(PVDF)膜作為基質(zhì)的轉(zhuǎn)印膜由Millipore公司在1985年首先推出。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)與硝酸纖維素膜相比,PVDF膜在蛋質(zhì)截留能力,機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)相容性上都更*的性能(Pluskal,et al.,1986)。硝酸纖維素膜的典型結(jié)合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜結(jié)合量是100-200μg/cm2(結(jié)合強(qiáng)度PVDF比硝纖膜強(qiáng)6倍)。在艾滋病毒(HIV)血清學(xué)檢驗(yàn)中直接比較PVDF和硝酸纖維素膜,PVDF膜具有更好的截留總HIV抗原能力并提高抗體檢測糖基化被膜抗原的性能。但是PVDF膜大的優(yōu)點(diǎn)不僅于此:更好的機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)耐受性使PVDF膜在各種染色應(yīng)用和多重免疫檢測中成為理想選擇;而且單個(gè)凝膠的泳道復(fù)本可用于多種目的,如考馬斯亮藍(lán)染色后切出條帶并進(jìn)行N-末端測序、蛋消化/肽分離/內(nèi)部測序和免疫檢測(Kurien,et al.,2003)。特別是需要做N端蛋測序,在相當(dāng)“嚴(yán)酷”的清洗條件下,當(dāng)尼龍或者硝纖膜已經(jīng)降解的情況下PVDF膜依然保持本色。所以PVDF也是要做蛋測序的*選擇。PVDF膜適用的檢測方法也不少,化學(xué)發(fā)光、常規(guī)顯色、同位素和標(biāo)準(zhǔn)染色都一樣OK,但不適合熒光。PVDF膜特別注意的是需要甲醇預(yù)處理(不超過15秒)再用緩沖液平衡,才能用,而且適用過程中萬一干了也要同樣程序再處理(轉(zhuǎn)膜后再這樣處理可能會影響后繼的抗體識別呢)。PVDF膜同樣分0.45um和0.2um的,后者孔徑小,對小分子蛋有較好的攔截吸附,背景可能會比前者稍高
〖保存〗:RT,保質(zhì)期7-10年
尼龍膜N+
〖英文名稱〗:Hybond-N+
規(guī)格:30×3cm/卷
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;M-860孔徑:0.45um
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:帶正電尼龍膜,對在堿性條件下雜交和普通的Southern雜交均有很好的靈敏性。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)尼龍膜更多是用于核酸的轉(zhuǎn)移,也有見于蛋印跡,比如dot blot,比較于NC膜來說,它的優(yōu)點(diǎn)是結(jié)合力強(qiáng),特結(jié)實(shí)又柔軟且不易卷曲,機(jī)械強(qiáng)度大,便于操作,缺點(diǎn)是背景高——由于尼龍膜電荷密度高,使得非結(jié)合區(qū)的封閉比疏水性

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