當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>感受態(tài)細(xì)胞>>根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞>> Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
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所 在 地上海市
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更新時間:2019-09-25 11:57:23瀏覽次數(shù):294次
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產(chǎn)品名稱 | Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 酵母感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
shēng huà shì jì DL-苯* 容量: 1公斤
shēng huà shì jì DL-苯甘氨醇 容量: 100克
shēng huà shì jì DL-苯* 容量: 1公斤
shēng huà shì jì DL-半*鹽酸鹽一水物 容量: 100克
shēng huà shì jì DL-半* 容量: RT,避光 5克
shēng huà shì jì DL-α-* 容量: RT 10克
shēng huà shì jì DL-4-羥基-3-甲氧基扁桃酸 容量: 5克
shēng huà shì jì DL3000 DNA Marker 容量: 5克
shēng huà shì jì DL-2-氨基丁酸 容量: 1公斤
shēng huà shì jì DL2000 DNA Marker 容量: RT 1克
shēng huà shì jì DG-18瓊脂 容量: 2~8℃ 25毫升
shēng huà shì jì DEAE纖維素DE-52 容量: 2~8℃ 10毫克
shēng huà shì jì DEAE纖維素DE-32 容量: 25毫升
shēng huà shì jì DEAE纖維素DE-23 容量: 5毫升
Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì DEAE纖維素 容量: 2~8℃ 1毫升
shēng huà shì jì DEAE瓊脂糖凝膠FF 容量: 250毫克
shēng huà shì jì DEAE瓊脂
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞
RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞
RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞
rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞
rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞
RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞
rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元
細(xì)胞名稱
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
人羊膜上皮細(xì)胞
人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞
容量: 3000U
shēng huà shì jì DEAE葡聚糖凝膠A-50 容量: 5KU
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 |
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