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更新時間:2019-09-25 11:21:20瀏覽次數(shù):163次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網GV3101(pSoup) 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細胞 50ul*50-生命科學儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*100-生命科學儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*50-生命科學儀器
GV3101 感受態(tài)細胞 100ul*10-生命科學儀器
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產品名稱 | MSU440 感受態(tài)細胞 100ul*100 |
包裝 | 100ul*100 |
分類 | 發(fā)根農桿菌感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
shēng huà shì jì 焦磷酸鈉 容量: 2~8℃ 5克
shēng huà shì jì 焦磷酸鉀 容量: 25克
shēng huà shì jì 焦磷酸鈣 容量: RT 1克
shēng huà shì jì 膠原酶 容量: 25克
shēng huà shì jì 膠原蛋白 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 膠回收kit 容量: RT 500克
shēng huà shì jì 交鏈聚乙烯吡咯烷酮 容量: 25克
shēng huà shì jì 健那綠 容量: 25克
shēng huà shì jì 堿性酯酶染液 容量: 40片/箱
shēng huà shì jì 堿性氧化鋁 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 堿性碳酸鉛 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 堿性瓊脂平板 容量: 5克
shēng huà shì jì 堿性品紅 容量: RT,避光 500毫克
shēng huà shì jì 堿性磷
RAb 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體 規(guī)格: 48T/96T
αFodrin IgG/IgA 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 規(guī)格: 48T/96T
大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit,48T/96T 大鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
MIF 大鼠巨噬細胞移動抑制因子 規(guī)格: 48T/96T
MSU440 感受態(tài)細胞 100ul*100 MIP-5 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白5 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1β/CCL4 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-1α/CCL3 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3β 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β 規(guī)格: 48T/96T
MIP-3α 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α 規(guī)格: 48T/96T
MIP-2 大鼠巨噬細胞炎性蛋白2 規(guī)格: 48T/96T
ì 堿性磷酸酶測試盒 容量: 500支/包
shēng huà shì jì 堿性磷酸酶 容量: 100克
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉化的感受態(tài)細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
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