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品 牌
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更新時(shí)間:2019-09-24 10:53:57瀏覽次數(shù):244次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱 | GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類 | 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
OVA sIgE
PaCoA 人磷酸化乙酰* 規(guī)格: 48T/96T
pERK 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格: 48T/96T
P-PKC 人磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格: 48T/96T
PGAM2 人磷酸甘油酸變位酶2 規(guī)格: 48T/96T
人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 人淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
Lptn/LTN/XCL1 人淋巴細(xì)胞趨化因子 規(guī)格: 48T/96T
LFA-3/CD58 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格: 48T/96T
LFA-2/CD2 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2 規(guī)格: 48T/96T
LFA-1/CD11a+CD18 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原1 規(guī)格: 48T/96T
LTB 人淋巴毒素β 規(guī)格: 48T/96T
LTA 人淋巴毒素α 規(guī)格: 48T/96T
LAP 人亮氨酰氨基肽酶 規(guī)格: 48T/96T
SK 人鏈激酶 規(guī)格: 48T/96T
人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T 人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
GS-ANA 人粒細(xì)胞特異性抗核抗體 規(guī)格: 48T/96T
GCP-2/CXCL6 人粒細(xì)胞趨化蛋白-2 規(guī)格: 48T/96T
GM-CSF Ab 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體 規(guī)格: 48T/96T
GM-CSF 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
G-CSF 人粒細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格: 48T/96T
KP 人利鉀尿肽 規(guī)格: 48T/96T
CG 人冷球蛋白 規(guī)格:shēng huà shì jì 固綠FCF 容量: 1公斤
GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì 固藍(lán)RR鹽 容量: 5毫克
shēng huà shì jì 固藍(lán)B鹽 容量: 1公斤
shēng huà shì jì 固藍(lán)BB鹽 容量: 保存:-20℃ 2毫克
shēng huà shì jì 固紅片劑 容量: 25克
shēng huà shì jì 固紅TR 容量: 5克
shēng huà shì jì 固紅RC 容量: 100克
shēng huà shì jì 固紅GG鹽 容量: 1克
shēng huà shì jì 固B鹽 容量: 2~8°C 50毫克
shēng huà shì jì 鈷粉 容量: 100克
shēng huà shì jì 鈷 容量: 保存:-20℃
48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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