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品 牌
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2019-09-24 11:02:18瀏覽次數(shù):313次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)GV3101(pSoup) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
GV3101 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器
GV3101 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*10-生命科學(xué)儀器
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產(chǎn)品名稱(chēng) | GV3101(pJlC SA-rep)感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 |
包裝 | 100ul*50 |
分類(lèi) | 表達(dá)感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27 規(guī)格: 48T/96T
TA 人抗磷壁酸抗體 規(guī)格: 48T/96T
ALG 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
ALA 人抗淋巴細(xì)胞抗體 規(guī)格: 48T/96T
ASO 人抗鏈球菌溶血素O/抗O 規(guī)格: 48T/96T
ADH/VP/AVP 人抗利尿激素/*加壓素 規(guī)格: 48T/96T
SCA 人抗類(lèi)固醇細(xì)胞抗體 規(guī)格: 48T/96T
RANA 人抗類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體 規(guī)格: 48T/96T
RANA 人抗類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-RV 人抗狂犬病毒抗體 規(guī)格: 48T/96T
anti-RV 人抗狂犬病毒抗體 規(guī)格: 48T/96T
GV3101(pJlC SA-rep)感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50 ENA-Ab 人抗可提取核抗原抗體 規(guī)格: 48T/96T
SLA 人抗可溶性肝抗原抗體 規(guī)格: 48T/96T
Attacin 人抗菌肽 規(guī)格: 48T/96T
anti-CMV IgM 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM 規(guī)格: 48T/96T
anti-CMV IgM 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM 規(guī)格: 48T/96T
anti-CMV IgG 人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG 規(guī)
shēng huà shì jì 蛋白酶K溶液 容量: 5克
shēng huà shì jì 蛋白酶K 容量: RT 1克
shēng huà shì jì 蛋白酶(枯草桿菌) 容量: RT 1克
shēng huà shì jì 蛋白胨水培養(yǎng)基 容量: 5克
shēng huà shì jì 蛋白胨 容量: 25克
shēng huà shì jì 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(總蛋白、白蛋白) 容量: RT 96支/盒
shēng huà shì jì 蛋白保護(hù)劑TY 容量: 5克
shēng huà shì jì 蛋白A瓊脂糖凝膠CL-4B 容量: 1克
shēng huà shì jì 蛋白A 容量: 100毫克
shēng huà shì jì 彈性蛋白酶(豬胰) 容量: 2~8℃,避光 10克
shēng huà shì jì 但馬膠 容量: 50毫克
shēng huà shì jì 膽鹽乳糖培養(yǎng)基 容量: 50克
shēng huà shì jì 膽鹽七葉苷瓊脂 容量: 25毫升
shēng huà shì jì 膽酸鈉(豬) 容量: 2~8℃ 1克
shēng huà shì jì 膽酸(牛) 容量: 500克
shēng huà shì jì 膽硫乳瓊脂 容量: 100克
shēng huà shì jì *脂酶測(cè)試盒 容量: RT 50支/包
格: 48T/96T
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。
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