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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纖維蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ANA 人抗核仁抗體 規(guī)格： 48T/96T

 gp210 人抗核膜糖蛋白210抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ANA 人抗核抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ASA 人抗骨骼肌抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-tox IgM 人抗弓形體IgM抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-tox IgG 人抗弓形體IgG抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AGAA 人抗高爾基體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LMA 人抗肝細胞膜抗體 規(guī)格： 48T/96T

GV3101（pJlC SA-rep）電擊感受態(tài)細胞 50ul*50 LC1 人抗肝細胞胞質1型抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LSP 人抗肝特異性脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 LKM 人抗肝腎微粒體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 CAM-ab 人抗鈣調素特異抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AT-DⅣ 人抗鈣蛋白酶抑素抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-PIV IgM 人抗副流感病毒IgM抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-RV IgG 人抗風疹病毒IgG抗體 規(guī)格： 48T/96T

 ABM-Ab 人抗肺泡基底膜抗體 規(guī)格： 48T/96T

 MSA 人抗紡錘體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 PM-Scl/PM-1 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體 規(guī)格： 48T/96T

 anti-HDV 人抗丁型肝炎病毒抗體 規(guī)格： 48T/96T

 PR3 Ab-IgG 人抗蛋白酶3抗體IgG 規(guī)格： 48T/96T

 ssDNA 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 規(guī)格： 48T/96T

 AMA 人抗單核細胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 TRAb 人抗促甲狀腺素受體抗體 規(guī)格：

shēng huà shì jì 次亞磷酸鈣 容量： RT 100克

shēng huà shì jì 次* 容量： 10克

shēng huà shì jì 次氯酸鈉 容量： 500克

shēng huà shì jì 次氯酸鈣 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 酸銨 容量： RT 500克

shēng huà shì jì 次甲基綠 容量： 100克

shēng huà shì jì 次鉍 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 純水 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 蟲膠 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 赤蘚糖醇 容量： 100克

shēng huà shì jì 赤霉素GA4+7 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 赤霉素GA3 容量： 500克

shēng huà shì jì 橙黃IV 容量： 2～8°C 100克

shēng huà shì jì 橙黃G6 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 橙黃Ⅱ 容量： 2～8°C 250克

shēng huà shì jì 橙黃Ⅰ 容量： 2～8°C 250克

shēng huà shì jì 成套緩沖劑 容量： 保存：-20℃ 50次/300ul/支

shēng huà shì jì 稱量紙 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 潮霉素B 容量： RT 25克

48T/96T

注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。