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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

TM 兔子血栓調節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 PAI-1 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1 規(guī)格： 48T/96T

 PAI 兔子纖溶酶原激活物抑制因子 規(guī)格： 48T/96T

 ICAM-3/CD50 兔子細胞間粘附分子3 規(guī)格： 48T/96T

 ICAM-2/CD102 兔子細胞間粘附分子2 規(guī)格： 48T/96T

 ICAM-1/CD54 兔子細胞間粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 DPD 兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 規(guī)格： 48T/96T

 DHEA-S 兔子脫氫表雄酮硫酸酯 規(guī)格： 48T/96T

 HA 兔子透明質酸 規(guī)格： 48T/96T

 MBP 兔子髓磷脂堿性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 RBP-4 兔子*結合蛋白4 規(guī)格： 48T/96T

 GHRP 兔子生長激素釋放多肽 規(guī)格： 48T/96T

 ADM 兔子腎上腺髓質素 規(guī)格： 48T/96T

 NT-4 兔子神經營養(yǎng)因子4 規(guī)格： 48T/96T

 NT-3 兔子神經營養(yǎng)因子3 規(guī)格： 48T/96T

 NSE 兔子神經特異性烯醇化酶 規(guī)格： 48T/96T

 NGF 兔子神經生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 GFAP 兔子神經膠質纖維酸性蛋白 規(guī)格： 48T/96T

Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*50 PGE2 兔子前列腺素E2 規(guī)格： 48T/96T

 PGE1 兔子前列腺素E1 規(guī)格： 48T/96T

 GIP 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 規(guī)格： 48T/96T

 CORT 兔子皮質酮/腎上腺酮 規(guī)格： 48T/96T

 Cortisol 兔子* 規(guī)格： 48T/

hēng huà shì jì 液體改良馬丁培養(yǎng)基 容量： 250毫升

shēng huà shì jì *測定培養(yǎng)基 容量： 50張/盒

shēng huà shì jì *鹽 容量： 25克

shēng huà shì jì 葉綠素B 容量： 100克

shēng huà shì jì 葉綠素A 容量： 2～8℃ 5克

shēng huà shì jì 耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基 容量： RT 支

shēng huà shì jì 氧氯化鋯 容量： 100克

shēng huà shì jì 氧化鍺 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氧化銪 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氧化銀 容量： RT，避光 5克

shēng huà shì jì 氧化釔 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 氧化亞銅 容量： 500克

shēng huà shì jì 氧化型輔酶Ⅱ 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氧化型輔酶Ⅰ 容量： 100克

shēng huà shì jì 氧化銅絲 容量： 100克

shēng huà shì jì 氧化銅粒 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氧化銅粉 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 氧化鐵 容量： 25克

shēng huà shì jì 氧化鈰 容量： 25克

shēng huà shì jì 氧化釤 容量： 25克

96T

注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。