購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

shēng huà shì jì 胭脂紅 容量： RT，避光 1克

shēng huà shì jì *測定培養(yǎng)基 容量： 50張/盒

shēng huà shì jì 亞硝基紅鹽 容量： RT，避光 10克

shēng huà shì jì 亞鐵氫化鉀 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 亞試劑 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 亞硫酸鹽瓊脂 容量： 2～8℃ 25毫升

shēng huà shì jì 亞硫酸鹽多粘菌素*瓊脂基礎(chǔ) 容量： 2～8℃ 25毫升

shēng huà shì jì 亞硫酸鐵瓊脂 容量： 100克

shēng huà shì jì 亞硫酸鈉瓊脂 容量： 1公斤

F-DH5α 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*100shēng huà shì jì 亞硫酸鈣 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 亞硫酸鉍指示劑 容量： 1米

shēng huà shì jì 亞硫酸鉍瓊脂基礎(chǔ) 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 亞硫酸銨 容量： 1克

shēng huà shì jì 亞磷酸三丁酯 容量： RT 100克

shēng huà shì jì 亞磷酸三苯酯 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 亞利桑那菌瓊脂 容量： RT 1米

shēng huà shì jì 亞精胺 容量： 2～8℃ 10克

shēng huà shì jì 亞甲基藍(lán) 容量： 100克

shēng huà shì jì 亞鈷鈉 容量： 500克

shēng huà shì jì 亞碲酸鹽肉湯基礎(chǔ) 容量： 100克

shēng huà shì jì 亞碲酸鹽卵黃增菌液 容量： 1米

shēng huà shì jì 亞碲酸鉀 容量： 100

 GHRP 牛生長激素釋放多肽 規(guī)格： 48T/96T

 EPI 牛腎上腺素 規(guī)格： 48T/96T

 NP-Y 牛神經(jīng)肽Y 規(guī)格： 48T/96T

 LF/LTF 牛乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 LS 牛乳糖合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 G6PD 牛葡萄糖6磷酸脫氫酶 規(guī)格： 48T/96T

 CS 牛檸檬酸合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 PCK 牛磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 規(guī)格： 48T/96T

 PFK 牛磷酸果糖激酶 規(guī)格： 48T/96T

牛淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 牛淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 B7-2/sCD86 ?？扇苄园准?xì)胞分化抗原86 規(guī)格： 48T/96T

 MT 牛金屬硫蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 Hpt/HP 牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CG 牛甘膽酸 規(guī)格： 48T/96T

 sIgA 牛分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 sIgA 牛分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 CIAP 牛的牛小腸堿性磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 Cholic acid 牛膽酸 規(guī)格： 48T/96T

 E2 牛雌二醇 規(guī)格： 48T/96T

克

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。