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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 β-EP 駱駝β內(nèi)啡肽 規(guī)格： 48T/96T

 CC16 裸鼠克拉拉細胞蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 AFP 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 COX-2 裸鼠環(huán)加氧酶2 規(guī)格： 48T/96T

 PP 裸鼠蛋白磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 MrNV 羅氏沼蝦諾達病毒 規(guī)格： 48T/96T

 MHC 鹿主要組織相容性復合體 規(guī)格： 48T/96T

 IGFBP-3 鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3 規(guī)格： 48T/96T

 SAA 鹿血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 eNOS 鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 EMP 鹿紅細胞膜蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 VTG 鯉魚卵黃蛋白原 規(guī)格： 48T/96T

F-*0 感受態(tài)細胞 100ul*100 VTG 鯉魚卵黃蛋白原 規(guī)格： 48T/96T

 UEA 荊豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T

 LT 家蠶卵黃蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 TGF-β1 雞轉(zhuǎn)化生長因子β1 規(guī)格： 48T/96T

 MHC/B 雞主要組織相容性復合體 規(guī)格： 48T/96T

 TRAIL-R3 雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3 規(guī)格： 48T/96T

 TNF-α 雞腫瘤壞死因子α 規(guī)格： 48T/96T

 LPS 雞脂多糖/內(nèi)毒素 規(guī)格： 48T/96T

 ACAC 雞乙酰乙酸檢測 規(guī)格： 48T/96T

 IGF-1 雞胰島素樣生長因子1 規(guī)格： 48T/96T

 NADPH 雞*腺嘌呤二

shēng huà shì jì 溴甲酚綠鈉 容量： 2～8°C 100毫克

shēng huà shì jì 溴甲酚綠-甲基紅指示劑溶液 容量： 1克

shēng huà shì jì 溴甲酚綠-甲基紅指示劑粉枕 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 溴甲酚綠 容量： 10克

shēng huà shì jì 溴化銀 容量： 25克

shēng huà shì jì 溴化亞銅 容量： 100克

shēng huà shì jì 溴化鋅 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 溴化銅 容量： 500克

shēng huà shì jì 溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 溴化十六烷基吡啶 容量： 2～8℃，避光 500毫克

shēng huà shì jì 溴化銫 容量： RT 5克

shēng huà shì jì * 容量： RT，避光 1克

shēng huà shì jì 溴化鋰 容量： RT 1克

shēng huà shì jì 溴化金 容量： 500克

shēng huà shì jì * 容量： 5克

shēng huà shì jì 溴化鎘 容量： 5克

shēng huà shì jì * 容量： 25克

shēng huà shì jì 溴酚藍鈉 容量： 2～8°C 5克

shēng huà shì jì 溴酚藍 容量： 100克

shēng huà shì jì 溴代十六烷 容量： 2～8℃ 250毫克

核苷酸磷酸 規(guī)格： 48T/96T

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。