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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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EPI400 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50-生命科學(xué)儀器

參   考   價(jià): 1000

訂  貨  量: ≥1  件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2019-09-20 16:10:14瀏覽次數(shù):347次

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EPI400 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品名稱EPI400 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50
包裝100ul*50
分類克隆感受態(tài)細(xì)胞

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

 

 PRL 雞催乳素 規(guī)格: 48T/96T

 FSH 雞促卵泡素 規(guī)格: 48T/96T

 LH 雞促黃體激素 規(guī)格: 48T/96T

 IC 雞傳染性鼻炎抗體 規(guī)格: 48T/96T

 C3SP 雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物 規(guī)格: 48T/96T

 DEV 雞病毒性腸炎病毒 規(guī)格: 48T/96T

 EGF 雞表皮生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T

 ALV-AG 雞白血病病毒抗原 規(guī)格: 48T/96T

 PD 雞白痢抗體檢測(cè) 規(guī)格: 48T/96T

 IL-4 雞白介素4 規(guī)格: 48T/96T

 IL-3 雞白介素3 規(guī)格: 48T/96T

 IL-2 雞白介素2 規(guī)格: 48T/96T

 IL-1β 雞白介素1β 規(guī)格: 48T/96T

 IL-18 雞白介素18 規(guī)格: 48T/96T

 IL-17 雞白介素17 規(guī)格: 48T/96T

 IL-1 雞白介素1 規(guī)格: 48T/96T

 IFN-γ 雞γ干擾素 規(guī)格: 48T/96T

 β-lactamase 雞β內(nèi)酰胺酶 規(guī)格: 48T/96T

 IFN-β/IFNB 雞β干擾素 規(guī)格: 48T/96T

 α-glucosidase 雞α葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T

 IFN-α 雞α干擾素 規(guī)格: 48T/96T

 NAG 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T

 PAL 雞L苯*解氨酶 規(guī)格: 48T/96T

 

shēng huà shì jì 小麥胚芽粉 容量: 25克

shēng huà shì jì 小分子量蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) 容量: 25克

shēng huà shì jì 硝苯吡啶 容量: 1克

shēng huà shì jì 香芹酚 容量: 2~8℃ 5克

shēng huà shì jì 香柏油 容量: RT 100克

shēng huà shì jì 腺嘌呤鹽酸鹽 容量: 25克

shēng huà shì jì 腺苷脫氨酶測(cè)試盒 容量: RT 200支/包

shēng huà shì jì 腺苷脫氨酶 容量: RT 1克

shēng huà shì jì 現(xiàn)隱肉湯 容量: 100毫升

shēng huà shì jì 莧菜紅 容量: 保存:-20℃ 1克

shēng huà shì jì 咸蛋黃瓊脂 容量: RT 100張/包

shēng huà shì jì 纖粘連蛋白 容量: RT 1克

shēng huà shì jì 纖維素透析袋 容量: 保存:-20℃ 500U

shēng huà shì jì 纖維素酶R-10 容量: 5克

EPI400 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*50shēng huà shì jì 纖維素酶(綠色木霉) 容量: RT 1克

shēng huà shì jì 纖維素薄膜 容量: 保存:-20℃ 1 O.D.

shēng huà shì jì 纖維蛋白(人血) 容量: RT 25克

shēng huà shì jì 細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基 容量: 50張/盒

shēng huà shì jì 細(xì)菌瓊脂粉 容量: 100克

shēng huà shì jì 細(xì)菌蛋白胨 容量: 5克

shēng huà shì jì 細(xì)菌L型增菌液 容量: 100克

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。

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