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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

-10/CXCL10 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10 規(guī)格： 48T/96T

 IRF 人干擾素調(diào)節(jié)因子 規(guī)格： 48T/96T

 CNR-1 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1 規(guī)格： 48T/96T

 CRT 人鈣網(wǎng)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 calnexin 人鈣聯(lián)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 VGCC 人鈣離子通道抗體 規(guī)格： 48T/96T

 CR 人鈣結(jié)合蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CAM 人鈣調(diào)素 規(guī)格： 48T/96T

 CaN 人鈣調(diào)磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 CaN 人鈣調(diào)磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T

 CALD 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CALD 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 histatin 5 人富組蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 PNP 人副腫瘤性天皰瘡抗體 規(guī)格： 48T/96T

 RPA-70 人復(fù)制蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 CPSA 人復(fù)合前列腺特異性抗原 規(guī)格： 48T/96T

 BA 人封閉抗體 規(guī)格： 48T/96T

 SLPI 人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子 規(guī)格： 48T/96T

 SIgA 人分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 MP-Ab 人肺炎支原體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 Cpn-Ab 人肺炎衣原體抗體 規(guī)格： 48T/96T

 PARC/CCL18 人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 SP-D 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D 規(guī)格：

1-甲基-4-哌啶甲酸甲酯 1690-75-1

DH10B 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*202-羥基異* 169253-31-0

BOC-D-* 16937-99-8

硼鈉 16940-66-2

六氟磷酸 16940-81-1

六氟磷酸銨 16941-11-0

乙酰乙酸叔丁酯 1694-31-1

(S)-1-N-Boc-2-甲基甲酸 169447-70-5

BOC-N-甲基-L-* 16948-16-6

48T/96T

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi)，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。