購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

LAC/LA 人狼瘡抗凝抗體 規(guī)格： 48T/96T

 Lyme-IgG 人萊姆IgG 規(guī)格： 48T/96T

 VacA 人空泡毒素相關(guān)蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 PEB1 人空腸彎曲菌黏附蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 CC16 人克拉拉細(xì)胞蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 ENA 人可提取核抗原 規(guī)格： 48T/96T

 sTfR 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 規(guī)格： 48T/96T

 sTRAIL 人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 規(guī)格： 48T/96T

 sTNF-R2 人可溶性腫瘤壞死因子受體2 規(guī)格： 48T/96T

 sTNF-R1 人可溶性腫瘤壞死因子受體1 規(guī)格： 48T/96T

 sTNFαR 人可溶性腫瘤壞死因子α受體 規(guī)格： 48T/96T

 Sam 人可溶性粘附分子 規(guī)格： 48T/96T

 sPECAM-1 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 SFMC 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物 規(guī)格： 48T/96T

 sVCAM-1 人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sEPCR 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 規(guī)格： 48T/96T

 VEGFR-2/sFLK-1 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2 規(guī)格： 48T/96T

 sAC 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶 規(guī)格： 48T/96T

 sCKR 人可溶性細(xì)胞因子受體 規(guī)格： 48T/9

4-三氟甲基肉桂酸 16642-92-5

2-羥基-4-溴苯甲酸 1666-28-0

甘氨酰胺鹽酸鹽 1668-10-6

D-*鹽酸鹽 16682-12-5

芐脒鹽酸鹽 1670-14-0

6-吲哚甲酸 1670-82-2

6-溴吲哚-2-羧酸 16732-65-3

B834(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞 100ul*105-溴吲哚-2-羧酸乙酯 16732-70-0

6-甲氧基吲哚-2-羧酸 16732-73-3

(R)-3-哌啶甲酸乙酯-L-酒石酸鹽 167392-57-6

滅多威 16752-77-5

L-*-5-芐酯 1676-73-9

硝酸鈰銨 16774-21-3

對苯二甲酸單甲酯 1679-64-7

5-溴-2-氯苯甲醚 16817-43-9

氫化鋁鋰 16853-85-3

L-天冬氨酸-beta-甲酯鹽酸鹽 16856-13-6

2-氨基-3-羥基吡啶 16867-03-1

2,3-二羥基吡啶 16867-04-2

氟硼酸 16872-11-0

2-四喃甲酸 16874-33-2

4-派啶乙酸甲酯 168986-49-0

6T

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。