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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

2-吡啶乙腈 2739-97-1

3-溴-4-氟* 27407-11-0

1,2-亞甲二氧基苯 274-09-9

L-(-)-二苯甲酰 2743-38-6

4-甲氧基溴芐 2746-25-0

反式對(duì)氨基環(huán)己醇 27489-62-9

L-氨基丙醇 2749-11-3

四苯基溴化 2751-90-8

*叔丁酯鹽酸鹽 27532-96-3

二鉬酸銨 27546-07-2

二硫代蘇糖醇 27565-41-9

1-(2-氨乙基)哌啶 27578-60-5

3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮 2758-18-1

1XL1-Blue 電擊感受態(tài)細(xì)胞 50ul*20-芐基甲酸 2759-17-3

三氟甲磺酸*基硅酯 27607-77-8

Boc-L-*甲酯 2766-43-0

5-氯噻唑-2-磺酰氯 2766-74-7

Cbz-DL-* 2768-56-1

二乙基膦?；宜崾宥□?27784-76-5

5-羥基* 27828-71-3

2,5-二甲氧基苯甲酸 2785-98-0

L-乳酸甲酯 27871-49-4

(R)-(-)-1-氨基-2-丙醇 2799-16-8

S-1-氨基-2-丙醇 2799-17-9

2-氯-6-三氟甲基* 28056

 PI Ab-IgG/IgM 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 規(guī)格： 48T/96T

 PL-A2 大鼠磷脂酶A2 規(guī)格： 48T/96T

 PI3K 大鼠磷酸肌醇3激酶 規(guī)格： 48T/96T

 pACCase 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶 規(guī)格： 48T/96T

 AMPK 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 規(guī)格： 48T/96T

 pERK 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 規(guī)格： 48T/96T

 P-PKC 大鼠磷酸化蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T

大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 Lptn/LTN/XCL1 大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子 規(guī)格： 48T/96T

 LFA-3/CD58 大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 規(guī)格： 48T/96T

 GM-CSF 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 G-CSF 大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子 規(guī)格： 48T/96T

 CC16 大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 sTRAIL 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 規(guī)格： 48T/96T

 sPECAM-1 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sVCAM-1 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sEPCR 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 規(guī)格： 48T/96T

 SBA 大豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T

 E.coli P 大腸桿菌宿主殘留蛋白檢測(cè)試劑盒 規(guī)格： 48T/96T

 cath-K 倉(cāng)鼠組織蛋白酶K 規(guī)格： 48T/96T

 TBG 倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 MMP-9 倉(cāng)鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B 規(guī)格： 48T/96T

 RANKL 倉(cāng)鼠核因子κB受體活化因子配基 規(guī)格： 48T/96T

 PHA 菜豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T

 LCA 扁豆凝集素 規(guī)格： 48T/96T

 RCA 蓖麻凝集素 規(guī)格： 48T/96T

 α-BGT α-銀環(huán)蛇毒素 規(guī)格： 48T/96T

6-45-2

注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA，不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
2．待感受態(tài)細(xì)胞融化后，向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
 5．根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時(shí)。